การทดสอบเอชไอวี, เอดส์ จะเข้ารับการตรวจ HIV PCR ได้อย่างไร? การทดสอบ HIV inf และ PCR

คำอธิบาย

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) ถูกประดิษฐ์ขึ้นในปี 1983 โดยนักชีวเคมีชาวอเมริกัน Carey B. Mullis ในปี 1993 เขาได้รับรางวัลโนเบลจากการค้นพบนี้

ทุกวันนี้ การประยุกต์ใช้ PCR เป็นวิธีชีววิทยาระดับโมเลกุลสมัยใหม่นั้นกว้างมาก การวินิจฉัย PCR ครอบครองสถานที่พิเศษในทางการแพทย์ และเหตุผลนั้นค่อนข้างง่าย: ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสทำให้สิ่งที่เป็นไปไม่ได้เป็นไปได้

การวินิจฉัย PCR มักถูกอธิบายเป็นรูปเป็นร่างว่าเป็นวิธีการที่คุณสามารถค้นหาเข็มในกองหญ้าแล้วสร้างกองหญ้าจากเข็มเหล่านี้ "เข็ม" คือชิ้นส่วนเล็กๆ ของสารพันธุกรรมของเซลล์ (DNA หรือ RNA)

ดังนั้นการค้นพบวิธีนี้จึงเป็นหนึ่งในเหตุการณ์ที่น่าทึ่งที่สุดในสาขาชีววิทยาระดับโมเลกุลในช่วงไม่กี่ทศวรรษที่ผ่านมา การพัฒนาวิธี PCR ช่วยให้การวินิจฉัยทางการแพทย์โดยทั่วไปก้าวไปสู่ระดับใหม่ในเชิงคุณภาพ

พื้นฐาน PCR

พื้นฐานของวิธีการนี้คือการเลือกคัดลอก (ขยาย) ซ้ำ ๆ ของบางส่วนของ DNA เพื่อให้ได้สารพันธุกรรมในปริมาณที่เพียงพอสำหรับการตรวจจับด้วยสายตา ในกรณีนี้ เฉพาะส่วนของ DNA เท่านั้นที่ถูกคัดลอก (ขยาย) หลายครั้ง โดยมีเงื่อนไขว่าจะมีอยู่ในวัสดุชีวภาพที่กำลังศึกษาอยู่

นอกจากนี้ การวิจัย นอกเหนือจากการเพิ่มจำนวนสำเนาของส่วน DNA แล้ว ยังช่วยให้สามารถปรับเปลี่ยนสารพันธุกรรมอื่นๆ ได้อีกด้วย ดังนั้นวิธีนี้จึงใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ การปฏิบัติทางชีวภาพและการแพทย์: ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อและโรคทางพันธุกรรม ในการระบุการกลายพันธุ์ จีโนไทป์ การสร้างความเป็นพ่อ การระบุตัวตนส่วนบุคคล ฯลฯ

PCR ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ

ปัจจุบัน การวินิจฉัยการติดเชื้อด้วย PCR เป็นหนึ่งในวิธีการทางห้องปฏิบัติการทางคลินิกที่แม่นยำ ละเอียดอ่อน และมีประสิทธิภาพที่สุด นอกจากนี้ ช่วงของเชื้อโรคที่ตรวจพบนั้นไม่จำกัดในทางปฏิบัติ - จะมีการพัฒนาระบบทดสอบสำหรับการวิเคราะห์ PCR ของเชื้อโรคที่ต้องการ

เนื่องจากความไวสูง PCR จึงช่วยให้คุณสามารถระบุเชื้อโรคได้แม้จะมีปริมาณน้อยที่สุด (นั่นคือ DNA ของมันเพียงไม่กี่โมเลกุลเท่านั้นที่มีอยู่ในวัสดุชีวภาพที่กำลังศึกษา)

PCR ตรวจพบเชื้อโรคของโรคติดเชื้อเมื่อไม่สามารถทำได้ด้วยวิธีการอื่น (ภูมิคุ้มกันวิทยา วัฒนธรรม กล้องจุลทรรศน์) ดังนั้น สำหรับสารติดเชื้อหลายชนิด วิธีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสจึงกลายเป็น "มาตรฐานทองคำ" โดยผ่านการทดสอบตามเวลาและทดสอบทางคลินิก ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อในห้องปฏิบัติการสมัยใหม่ PCR เป็นวิธีการที่ละเอียดอ่อนและเฉพาะเจาะจงที่สุดในการตรวจหาเชื้อโรคโดยตรง สิ่งนี้ช่วยให้ไม่เพียง แต่สร้างสาเหตุของโรคเท่านั้น แต่ยังช่วยติดตามกระบวนการติดเชื้อและประเมินประสิทธิผลของการรักษาอีกด้วย

การทดสอบโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์โดยใช้วิธี PCR มีความเกี่ยวข้องเป็นพิเศษกับกระบวนการติดเชื้อที่ไม่มีอาการซึ่งเกิดจากจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคโดยไม่มีเงื่อนไข (หนองในเทียม, การตรวจ DNA เชิงคุณภาพ, มัยโคพลาสมา, การตรวจ DNA เชิงคุณภาพ, โรคหนองใน, การตรวจ DNA เชิงคุณภาพ, เชื้อ Trichomonosis, การตรวจ DNA เชิงคุณภาพ) ตัวอย่างเช่น ด้วยโรคหนองในเรื้อรังในสตรี แม้จะใช้วิธีการทางแบคทีเรีย ก็มักจะไม่สามารถระบุโรคหนองในได้ แม้ว่าจะมีอาการของกระบวนการอักเสบเรื้อรังในปากมดลูกหรือท่อปัสสาวะอยู่ก็ตาม

การวินิจฉัย PCR สมัยใหม่ไม่เพียงแต่ช่วยให้สามารถระบุสารพันธุกรรมของสารติดเชื้อได้เท่านั้น แต่ยังช่วยระบุความเข้มข้นของ DNA/RNA ของสารนั้นด้วย (รูปแบบการวิจัยเชิงปริมาณ) การกำหนดจำนวนเชื้อโรคเป็นสิ่งสำคัญในการตัดสินใจในการรักษา โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากมีการระบุจุลินทรีย์ฉวยโอกาส (Mycoplasma, การตรวจวัดเชิงปริมาณของ DNA, การพิมพ์ของ Ureaplasma, การตรวจวัดเชิงปริมาณของ DNA)

แนวทางหลักประการหนึ่งในการพัฒนาวิธี PCR คือรูปแบบ "Multiprime" ที่พัฒนาขึ้นที่ CMD ซึ่งทำให้สามารถตรวจพบเชื้อโรคหลายชนิดในหลอดทดลองเดียว (และปฏิกิริยาเดียว)

  • เชื้อโรคของการติดเชื้อที่ส่งโดยเห็บ ixodid

การวินิจฉัย PCR ของโรคตับอักเสบ

ปัจจุบันมีไวรัสอย่างน้อย 5 ชนิดที่ได้รับการพิสูจน์ความสามารถในการทำลายตับแล้ว สิ่งเหล่านี้เป็นสาเหตุของโรคตับอักเสบ A, B, C, D, E ในบางกรณี โรคตับอักเสบอาจเกิดจากไวรัส Epstein-Barr และไวรัสเริม ความสามารถของสารต่างๆ เช่น ไวรัส TT และไวรัสตับอักเสบ G ในการติดเชื้อในตับยังไม่ได้รับการยอมรับจากทุกคนในปัจจุบัน ไวรัสทั้งหมดเหล่านี้เป็นของครอบครัวที่แตกต่างกันมีคุณสมบัติทางชีวภาพที่แตกต่างกันดังนั้นกลยุทธ์การรักษาจะแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญขึ้นอยู่กับสาเหตุของโรคตับอักเสบ

เมื่อคำนึงถึงข้างต้นปัญหาเร่งด่วนมากคือการวินิจฉัยสาเหตุโรคไวรัสตับอักเสบอย่างเพียงพอพร้อมการระบุเชื้อโรคที่เฉพาะเจาะจง สิ่งนี้เป็นไปไม่ได้หากปราศจากการใช้วิธีทางอณูชีววิทยาสมัยใหม่ ดังนั้นการวินิจฉัยโรคตับอักเสบโดยใช้วิธีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสจึงเป็นขั้นตอนที่สำคัญที่สุดขั้นตอนหนึ่งในการระบุสาเหตุของโรคและกำหนดแนวทางการรักษาต่อไป

PCR ในการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี

ในปัจจุบัน สำหรับการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการเกี่ยวกับการติดเชื้อ HIV นั้น ใช้วิธีการที่มีความละเอียดอ่อนที่สามารถเข้าถึงได้มากที่สุดและในเวลาเดียวกัน - การตรวจหาแอนติบอดีต่อ HIV ในเลือดโดยใช้การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) - ตามด้วยการยืนยันผลลัพธ์ที่เป็นบวกของ การวิเคราะห์โดยใช้อิมมูโนล็อตติง (IB) ประสิทธิภาพในการระบุผู้ติดเชื้อเอชไอวีโดยใช้วิธีนี้อาจสูงถึง 99% หรือมากกว่านั้น

แต่การวินิจฉัยทางเซรุ่มวิทยาของการติดเชื้อ HIV นั้นมีข้อจำกัดหลายประการ:

  1. ความไร้ประสิทธิภาพในช่วงเวลาที่เรียกว่า “ หน้าต่างทางเซรุ่มวิทยา” (ในสัปดาห์แรกหลังการติดเชื้อจะตรวจไม่พบแอนติบอดีเนื่องจากไม่มีหรือมีความเข้มข้นต่ำ)
  2. แอนติบอดีต่อเอชไอวีถูกตรวจพบมาเป็นเวลานานในเด็กทุกคนที่เกิดมาจากมารดาที่ติดเชื้อเอชไอวี
  3. ผลการตรวจ ELISA ที่เป็นเท็จเนื่องจากการมีอยู่ในเลือดของแอนติบอดีต่อแอนติเจนที่คล้ายกับแอนติเจนของ HIV
  4. ผลลบลวงและน่าสงสัยของ ELISA และ immunoblotting (โดยเฉพาะในผู้ป่วยระยะสุดท้ายของโรค)

จึงมีการนำการตรวจ PCR เพื่อคัดกรองการติดเชื้อเอชไอวีมาใช้มากขึ้น ตาม "คำแนะนำด้านระเบียบวิธีสำหรับการทดสอบการติดเชื้อเอชไอวี" (อนุมัติโดยกระทรวงสาธารณสุขและการพัฒนาสังคมของสหพันธรัฐรัสเซียเมื่อวันที่ 08/06/2550) "หากมีเกณฑ์ทางระบาดวิทยาที่บ่งชี้ถึงความเสี่ยงล่าสุดของการติดเชื้อเอชไอวีสำหรับผู้ป่วยและที่ ในเวลาเดียวกันสันนิษฐานว่าผลบวกลวงหรือลบลวงใน ELISA และ IB เช่น เมื่อตรวจเด็กที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อ HIV หรือผู้ป่วยในช่วง “หน้าต่างซีโรเนกาทีฟ” จะใช้วิธี PCR ซึ่งตรวจจับเอชไอวี วัสดุยีน…” และในกรณีของการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีที่เป็นที่ยอมรับแล้ว การวิเคราะห์ PCR จะใช้ในการพยากรณ์โรค การสังเกตแบบไดนามิก และการติดตามการรักษา

  • ไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์, การตรวจวัดเชิงคุณภาพของโปรไวรัส DNA, PCR
  • การกำหนดปริมาณไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ของ RNA, PCR
  • การวินิจฉัยที่ครอบคลุม: การตรวจวิเคราะห์เชิงคุณภาพสำหรับไวรัสตับอักเสบซี RNA/ไวรัสตับอักเสบบี DNA/ไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ (HIV) RNA ประเภท 1 และ 2

ที่ศูนย์การวินิจฉัยระดับโมเลกุล (CMD) คุณสามารถทำการทดสอบ PCR สำหรับ HIV โดยไม่เปิดเผยตัวตน

PCR (ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส) เป็นวิธีการทางอณูพันธุศาสตร์ที่ช่วยให้คุณสามารถวิเคราะห์ลำดับสั้น ๆ ของ DNA (หรือ RNA) แม้ในตัวอย่างที่มี DNA หรือ RNA ในปริมาณเพียงเล็กน้อย ดังนั้นจึงกำหนดการมีอยู่/ไม่มีของเชื้อโรคที่ทำให้เกิดโรค (เพื่อ ตรวจสอบว่ามีเชื้อเอชไอวีในมนุษย์ ไวรัสตับอักเสบบี หรือเชื้อมัยโคแบคทีเรียมวัณโรค) PCR ใช้ในการทำซ้ำ/คูณ/โคลน (ขยาย) ส่วนที่เลือกของ DNA หรือ RNA เพื่อการวิเคราะห์

วิธี PCR นั้นง่ายมาก แม้แต่เด็กนักเรียนก็สามารถทำได้)

ก่อนหน้านี้ การขยาย DNA เกี่ยวข้องกับการโคลนส่วนที่สนใจเป็นเวกเตอร์การแสดงออกของแบคทีเรียและใช้เวลาหลายสัปดาห์ แต่ตอนนี้ PCR เสร็จสิ้นในหลอดทดลองแล้ว ใช้เวลาเพียงไม่กี่ชั่วโมงเท่านั้น. PCR คือ มีประสิทธิภาพสูงจึงสามารถคัดลอกจาก DNA ได้จำนวนมาก

ลำดับดีเอ็นเอและความสอดคล้องของนิวคลีโอไทด์

ขอให้มือของผู้ให้ไม่มีวันล้มเหลว

โครงการ "AIDS.HIV.STD" เป็นองค์กรไม่แสวงผลกำไร ก่อตั้งโดยอาสาสมัครผู้เชี่ยวชาญด้าน HIV/AIDS โดยออกค่าใช้จ่ายเองเพื่อนำความจริงมาสู่ผู้คนและเพื่อให้ชัดเจนต่อหน้าจิตสำนึกวิชาชีพของพวกเขา เราจะขอบคุณสำหรับความช่วยเหลือใด ๆ ในโครงการ ขอให้ได้รับผลตอบแทนเป็นพันเท่า: บริจาค .

นอกจากนี้ PCR ยังใช้โมเลกุลเดียวกับที่ธรรมชาติใช้ในการคัดลอก DNA:

  • "ไพรเมอร์" 2 ลำดับ ซึ่งเป็นลำดับ DNA แบบเกลียวเดี่ยวสั้นๆ ที่ถูกสังเคราะห์เพื่อให้ตรงกับจุดเริ่มต้นและจุดสิ้นสุดของการขยาย DNA ที่จะคัดลอก
  • เอนไซม์ที่เรียกว่าโพลีเมอเรสซึ่งเคลื่อนที่ไปตามส่วนของ DNA อ่านรหัสและประกอบสำเนา
  • บล็อก DNA จำนวนหนึ่งที่โพลีเมอเรสนี้จำเป็นต้องสร้าง

นั่นคือ PCR เป็นเทคนิคที่อนุภาค DNA (บางครั้ง RNA) จะถูกคูณในสารละลายบางชนิดหรือบนพื้นผิวพิเศษที่สามารถสะสมได้

PCR เป็นเทคนิคที่ช่วยให้นักวิทยาศาสตร์ค้นหาเข็มในกองหญ้าแล้วสร้างกองหญ้าจากเข็มเหล่านั้น

หน้าที่ของ PCR เป็นวิธีหนึ่งคือการคูณ (ขยาย) ทำสำเนาให้ได้มากที่สุดเพื่อให้สามารถระบุได้ว่าเป็นใคร (บุคคล สัตว์ หรือสิ่งมีชีวิตที่ทำให้เกิดโรค) แม้ว่าจะมีเพียง ร่องรอยการมีอยู่ของ DNA/RNA


อย่างไรก็ตาม การขยาย PCR เป็นเพียงส่วนหนึ่งของการทดสอบวินิจฉัยเท่านั้น หลังจากขยายแล้ว ส่วนที่ขยาย จำเป็นต้องเปรียบเทียบกับส่วนนิวคลีโอไทด์อื่นๆ, แต่มาจากแหล่งที่รู้จักกันดี(เช่น บุคคล สัตว์ หรือสิ่งมีชีวิตที่ทำให้เกิดโรค) การเปรียบเทียบส่วนเฉพาะนี้มักดำเนินการโดยการวางลำดับนิวคลีโอไทด์ที่สร้างโดย PCR ถัดจากลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ทราบจากมนุษย์ เชื้อโรค หรือแหล่งอื่นๆ ในเจลพิเศษ

เมื่อกระแสไฟฟ้าไหลผ่านเจล ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่แตกต่างกันจะก่อตัวเป็นแถบที่มีลักษณะคล้าย "บันได" ตามประจุไฟฟ้าและขนาดโมเลกุล สิ่งนี้เรียกว่าเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส พวกมันจะย้ายไปยังระดับเดียวกันในเจล ซึ่งแสดงเอกลักษณ์ของลำดับนิวคลีโอไทด์ วิธีนี้เป็นหนึ่งในการทดสอบ PCR ระยะสุดท้ายที่ได้รับความนิยมมากที่สุด


PCR ทำงานอย่างไร?

ในปี 1983 คารี มัลลิสได้พัฒนาขั้นตอนพื้นฐานในการขยายลำดับดีเอ็นเอ เขาและ Michael Smith ได้รับรางวัลโนเบลสาขาการพัฒนา PCR ในปี 1993

PCR ดำเนินการในหลอดทดลองหลอดเดียวโดยใช้สารเคมีที่เหมาะสมและที่อุณหภูมิความร้อนระดับหนึ่ง

ต้องใช้รีเอเจนต์หรือสารเคมีต่อไปนี้:

  • ตัวอย่างที่มีลำดับนิวคลีโอไทด์ (จากเลือด ผม หนอง ผิวหนัง ฯลฯ)
  • DNA Primers: DNA สายเดี่ยวสั้น ๆ ที่ติดอยู่กับลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ส่งเสริมการสังเคราะห์สายเสริมของนิวคลีโอไทด์
  • DNA polymerase: เอนไซม์ที่เมื่อ DNA จับกับไพรเมอร์ จะเคลื่อนลงไปตามส่วนของ DNA โดยเพิ่มหน่วยการสร้าง DNA เพื่อสร้างคู่เบสที่เสริมกัน และด้วยเหตุนี้จึงสังเคราะห์สายโซ่นิวคลีโอไทด์เสริมของ DNA (การแนะนำของ DNA polymerase ที่คงความร้อนได้, Taq polymerase ซึ่งได้มา จากแบคทีเรียทนความร้อนช่วยเพิ่มความสามารถ PCR ได้อย่างมาก)
  • โครงสร้าง DNA จำนวนมากที่เรียกว่านิวคลีโอไทด์ (อะดีนีน ไทมิดีน ไซโตซีน และกัวนีน เรียกโดยย่อว่า: A, T, C และ G ตามลำดับ) ในสารละลาย เมื่อบล็อกเหล่านี้เชื่อมต่อกัน จะเกิดลำดับนิวคลีโอไทด์หรือดีเอ็นเอสายเดี่ยว เมื่อบล็อคการสร้างเหล่านี้ผูกบล็อคที่เสริมกันด้วยพันธะไฮโดรเจนที่อ่อนแอ (เช่น A จะพันธะกับ T เท่านั้น และ G จะพันธะกับ C เท่านั้น) ลำดับนิวคลีโอไทด์ของ DNA เสริมจะเกิดขึ้นซึ่งเชื่อมโยงกับ DNA สายเดี่ยวดั้งเดิม เมื่อการจับเสร็จสมบูรณ์ DNA ที่มีเกลียวคู่คู่สมจะถูกสร้างขึ้นในลำดับเฉพาะ

Kari Mullis เป็นคนที่น่าสนใจและเท่มาก ดูสิว่าเขาพูดถึงวิธีคิด PCR ขึ้นมาได้อย่างไร:

เขาเชื่อเรื่องโหราศาสตร์ แต่ไม่เชื่อว่า HIV ทำให้เกิดโรคเอดส์)

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสเริ่มต้นด้วยส่วนของ DNA จากตัวอย่าง ซึ่งวางอยู่ในหลอดที่บรรจุรีเอเจนต์ข้างต้น สารละลายได้รับความร้อนถึง 94°C การให้ความร้อนจะทำลายพันธะไฮโดรเจนที่ทำให้สาย DNA เสริมกันก่อตัวขึ้น ดังนั้นจึงมีเพียงสายเดี่ยวเท่านั้นที่อยู่ในส่วนผสม (ซึ่งเรียกว่าการสูญเสียสภาพธรรมชาติของ DNA สายคู่)


ปล่อยให้ของผสมเย็นลงถึง 54°C ที่อุณหภูมินี้ ไพรเมอร์ DNA และ DNA polymerase จับกับ DNA สายเดี่ยวแต่ละสาย (เรียกว่าการหลอม DNA) เนื่องจากส่วนประกอบมีมากเกินไป (ความเข้มข้นสูง) ในส่วนผสม โพลีเมอเรสจึงใช้ส่วนประกอบเหล่านี้เพื่อสร้างสายดีเอ็นเอเสริมใหม่ (เรียกว่าส่วนขยายของดีเอ็นเอ) และกระบวนการนี้จะเกิดขึ้นเร็วขึ้นที่อุณหภูมิ 72°C กระบวนการนี้จะสร้างโมเลกุล DNA ที่มีเกลียวคู่ขึ้นมาใหม่จากแต่ละเกลียวของโมเลกุลดั้งเดิม

วงจรนี้เกิดขึ้นซ้ำประมาณ 40 ครั้งในเครื่องที่เรียกว่าเทอร์มอลไซเคิล ซึ่งจะทำซ้ำวงจรการให้ความร้อน-ความเย็นโดยอัตโนมัติ โดยปริมาณของลำดับ DNA แต่ละลำดับจะเพิ่มขึ้นสองเท่าในแต่ละครั้งที่วงจรการให้ความร้อน-ความเย็นเสร็จสิ้น เดิมทีเป็นส่วนสั้น ๆ ของ DNA สามารถขยายเป็นประมาณ 100 พันล้านสำเนาหลังจาก 40 รอบสองเท่า

จำเป็นต้องมีการทดสอบ PCR เมื่อใด?

การทดสอบ PCR เป็นพื้นฐานของการทดสอบจำนวนหนึ่งที่สามารถตอบคำถามทางการแพทย์ต่างๆ มากมายที่ช่วยให้แพทย์วินิจฉัยและรักษาผู้ป่วยได้ ตัวอย่างเช่น การทดสอบ PCR สามารถทำได้ ตรวจจับและระบุสิ่งมีชีวิตที่ทำให้เกิดโรคในผู้ป่วย โดยเฉพาะผู้ที่เพาะเลี้ยงยาก (เช่น เอชไอวีและไวรัสอื่นๆ และเชื้อราบางชนิด).

แพทย์บางคนกำหนดให้ทำการทดสอบ PCR เพื่อช่วยในการวินิจฉัย โรคทางพันธุกรรมในขณะที่แพทย์คนอื่นๆ ใช้ PCR เพื่อตรวจหาความสัมพันธ์ทางชีวภาพ เช่น บัตรประจำตัวผู้ปกครองของเด็ก. การทดสอบ PCR ยังใช้เพื่อระบุและจำแนกลักษณะเฉพาะ การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมและพบการจัดเรียงใหม่อย่างแน่นอน โรคมะเร็ง.

อย่างไรก็ตาม การทดสอบ PCR ได้รับการแก้ไขและนำไปใช้กับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์หลายด้าน รวมถึงชีววิทยาวิวัฒนาการ การพิมพ์ลายนิ้วมือทางพันธุกรรม การวิจัยทางนิติวิทยาศาสตร์ และอื่นๆ อีกมากมาย

RT-PCR คืออะไร?

Reverse transcriptase PCR (RT-PCR) คือการทดสอบ PCR ที่ออกแบบมาเพื่อตรวจจับและวัดปริมาณของ RNA แม้ว่าการทดสอบ PCR เบื้องต้นจะขยาย DNA แต่ไวรัสจำนวนมากและส่วนประกอบทางชีวภาพอื่น ๆ (เช่น ไมโตคอนเดรีย) ใช้ RNA เป็นสารพันธุกรรม RT-PCR แตกต่างจาก PCR ทั่วไปโดยการนำ RNA มาใช้ก่อนแล้วเปลี่ยนสาย RNA ให้เป็นสาย DNA ซึ่งทำได้ด้วยวิธีเดียวกันสำหรับ PCR ที่อธิบายไว้ข้างต้น ยกเว้นการใช้เอนไซม์ที่เรียกว่า Reverse transcriptase แทน DNA polymerase

Reverse transcriptase ช่วยให้ RNA หนึ่งสายถูกแปลงเป็นสาย DNA เสริม เมื่อปฏิกิริยานี้เกิดขึ้น จะสามารถใช้วิธี PCR ประจำเพื่อขยาย DNA ได้ RT-PCR ใช้ในการตรวจจับและศึกษาไวรัส RNA หลายชนิด ไม่ควรสับสนระหว่าง RT-PCR กับ PCR อื่นที่เรียกว่า PCR แบบเรียลไทม์

PCR แบบเรียลไทม์เป็นรูปแบบหนึ่งของ PCR ที่ช่วยให้วิเคราะห์ DNA ที่ขยายได้ภายใน 40 รอบปกติของขั้นตอน แม้ว่าขั้นตอนนี้จะคล้ายกับ PCR สำหรับการปั่นจักรยานทั่วไป แต่ PCR แบบเรียลไทม์จะใช้สีย้อมฟลูออเรสเซนต์ที่ติดอยู่กับส่วนประกอบบางส่วนหรือเส้นนิวคลีโอไทด์ขนาดเล็ก ขึ้นอยู่กับวิธีการที่ใช้ การเรืองแสงจะเกิดขึ้นเมื่อมีการสร้างสาย DNA ที่ขยายเพิ่มขึ้น ปริมาณเรืองแสงสามารถวัดได้มากกว่า 40 รอบ และช่วยให้นักวิจัยสามารถวัดผลิตภัณฑ์เฉพาะและปริมาณของผลิตภัณฑ์ในระหว่างรอบการขยายสัญญาณ

ซึ่งมักจะช่วยให้นักวิจัยหรือช่างเทคนิคสามารถข้ามเจลอิเล็กโทรโฟเรซิสหรือขั้นตอนรองอื่นๆ ที่จำเป็นในการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ PCR ได้ จึงให้ผลลัพธ์ที่รวดเร็วยิ่งขึ้น PCR แบบเรียลไทม์และ RT-PCR เป็นรูปแบบหรือการปรับเปลี่ยนของการทดสอบ PCR ดั้งเดิม อย่างไรก็ตาม มีตัวเลือกอื่นๆ อีกมากมาย (อย่างน้อย 25 รายการ) ที่มีอยู่และใช้เพื่อแก้ไขปัญหาเฉพาะ โดยทั้งหมดมีชื่อที่แตกต่างกัน เช่น Assembly PCR, Hot Start PCR, Multiplex PCR, Solid-State PCR และอื่นๆ อีกมากมาย

การทดสอบ PCR สำหรับเอชไอวีคืออะไร?

พีซีอาร์(ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส) - วิธีการเพิ่มจำนวนสารพันธุกรรมของไวรัส การทดสอบที่กำหนดสารพันธุกรรมของไวรัส- เอชไอวีอาร์เอ็นเอหรือดีเอ็นเอ

หากไวรัสมีอยู่ในปริมาณน้อยที่สุด ผลจากปฏิกิริยา ปริมาณนี้จะเพิ่มขึ้นหลายเท่า ดังนั้น PCR จึงมีค่าการวินิจฉัยสูง

โดยทั่วไปแล้วการทดสอบนี้ใช้เพื่อกำหนด เอชไอวีในเลือดบริจาคหรือ เพื่อการตรวจหาเชื้อเอชไอวีตั้งแต่เนิ่นๆในร่างกายก่อนการผลิตแอนติบอดีจำเพาะต่อเอชไอวี แอนติบอดีจำเพาะจะถูกตรวจพบโดยการทดสอบเอชไอวีแบบธรรมดา (ELISA) แต่เพียง 1-3 เท่านั้น แทบจะไม่ถึง 12 เดือนหลังการติดเชื้อ ก เมื่อใช้ PCR คุณจะสามารถให้คำตอบที่ค่อนข้างแม่นยำได้หลังจากผ่านไป 14 วันด้วยความมั่นใจ 98% และแม้จะผ่านไป 5 วัน แต่หลังจากนั้นความมั่นใจก็จะเป็น 80% HIV PCR นั้นเป็นการทดสอบที่มีราคาแพงและต้องใช้แรงงานมากกว่า ELISA ไม่ใช่ทุกคนที่ใช้มันแต่สำหรับข้อบ่งชี้พิเศษเท่านั้น (ผู้บริจาคที่ประสบอุบัติเหตุทางการแพทย์กับผู้ติดเชื้อ HIV) หรือโดยมีค่าธรรมเนียม

การทดสอบ PCR เชิงคุณภาพสำหรับเอชไอวี— กำหนดว่ามีไวรัส HIV-1/HIV-2 อยู่หรือไม่ แต่ไม่ได้กำหนดจำนวนสำเนาของไวรัส (ใช้ PCR เชิงปริมาณเพื่อกำหนดจำนวน) PCR คุณภาพสูงไม่ได้ทำสำหรับผู้ที่ทราบการวินิจฉัยการติดเชื้อ HIV ของเขา พวกเขาทำเฉพาะกับผู้ที่ยังไม่รู้ว่าตนเองติดเชื้อเอชไอวีหรือไม่

นี่เป็นวิธีการระบุบริเวณ DNA เสริมในจีโนมของเซลล์เม็ดเลือดขาวที่ได้รับผลกระทบจากเชื้อ HIV เหล่านั้น. ไม่ใช่ตัวไวรัสที่กำหนด แต่เป็นวัสดุที่ไวรัสรวมเข้ากับเซลล์ DNA ของมันจะถูกเก็บไว้ในนิวเคลียสของเซลล์แล้ว จากนั้นมันจะถูกอ่านและคูณ (คัดลอกตัวเอง)

การทดสอบ PCR เชิงปริมาณสำหรับเอชไอวี

การวิเคราะห์ PCR เชิงปริมาณสำหรับ HIV RNA— กำหนดจำนวนสำเนาของไวรัส RNA ในเลือด (ใช้ DNA PCR เพื่อตรวจหาไวรัสในเซลล์ เช่น ในเด็ก) ทำเฉพาะกับผู้ติดเชื้อ HIV เท่านั้นเพื่อติดตามการรักษา กำหนดความรุนแรงของกระบวนการเกิดโรค และประสิทธิผลของการรักษา

หลังจากติดเชื้อ HIV ด้วยวิธี PCR จะสามารถตรวจพบได้นานแค่ไหน?

ฉันสามารถทำการทดสอบ HIV PCR ภายหลังได้กี่วันหลังจากติดต่อกับคู่ครองที่ติดเชื้อ HIV?

เอชไอวีสามารถตรวจพบได้โดยใช้ PCR 4-14 วันหลังการติดเชื้อ ผล PCR ที่เป็นลบสำหรับ HIV นั้นเชื่อถือได้หลังจาก 14 วันหลังจากการสัมผัสที่มีความเสี่ยง แต่ตามกฎระเบียบปัจจุบัน ยังคงต้องมีการทดสอบโดยใช้ความช่วยเหลือ

DNA PCR แตกต่างจาก HIV RNA PCR อย่างไร

อาร์เอ็นเอโดยทั่วไปจะใช้ในการทดสอบเชิงปริมาณเพื่อประเมินปริมาณไวรัสในบุคคลที่ได้รับการวินิจฉัย เช่น เพื่อประเมินประสิทธิผลของการรักษา

ดีเอ็นเอ- ในเซลล์โมโนนิวเคลียร์ เช่น สำหรับการวินิจฉัยในเด็ก โดยที่แอนติบอดีต่อเอชไอวีของมารดาป้องกันการใช้วิธี ELISA

การทดสอบทั้งสองสามารถเป็นได้ทั้งเชิงปริมาณและเชิงคุณภาพ

ทั้งสองสามารถใช้ในกรณีพิเศษสำหรับการวินิจฉัย แต่คำนึงถึงข้อ จำกัด เฉพาะที่กำหนดโดยพารามิเตอร์ทางเทคนิคของระบบเช่น ตามที่แพทย์สั่ง

HIV PCR สามารถเป็นผลบวกลวงได้หรือไม่ เหตุผล?

ถ้าทำถูกต้อง: พยาบาลไม่ได้ผสมหลอด, ดูพาสปอร์ตก่อนเจาะเลือด, ติดป้ายหลอดให้ถูกต้อง, เขียนทิศทางให้ถูกต้อง ฯลฯ และผู้เชี่ยวชาญประจำห้องปฏิบัติการ (ปกติจะเป็นผู้ช่วยห้องปฏิบัติการ) ทำทุกอย่างตามคำแนะนำเขา ตรงตามข้อกำหนดทั้งหมดของกฎข้อบังคับของห้องปฏิบัติการ (เช่น วัสดุชีวภาพถูก “ขุด” อย่างถูกต้อง โดยไม่มีการปนเปื้อนข้าม (การปนเปื้อน) ฯลฯ) และใช้ระบบการทดสอบคุณภาพสูง จากนั้น PCR จะสามารถตรวจพบผลบวกลวงได้เพียงใน 2 % ของกรณี (เนื่องจากความไวของระบบทดสอบที่ใช้)

แต่ หากเกิดความผิดพลาดจากบุคลากรทางการแพทย์สถาบัน จากนั้น PCR อาจเป็นผลบวกลวงได้มากกว่า 2% ของกรณี

การตรวจ PCR สำหรับ HIV ดำเนินการอย่างไร?

ในการตรวจหาเชื้อเอชไอวีโดยใช้วิธี PCR จะบริจาคเลือดจากหลอดเลือดดำ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง (แต่ไม่จำเป็น) ในตอนเช้าขณะท้องว่าง

ฉันจะไปตรวจ HIV PCR ได้ที่ไหน?

หากต้องการทำสิ่งนี้ ให้ป้อน " ทำการตรวจ HIV PCR"และเพิ่มพื้นที่ของคุณลงในคำขอ แล้วคุณจะเห็นองค์กรที่มีส่วนร่วมในการวิจัย PCR ในพื้นที่ของคุณ

ตัวอย่างเช่น,

การตรวจ PCR HIV มีค่าใช้จ่ายเท่าไร?

ใกล้ 1.5-3 พันรูเบิลขึ้นอยู่กับภูมิภาค

ความน่าเชื่อถือของผลการตรวจ PCR สำหรับ HIV คืออะไร?

ผ่าน 14 วันหลังการติดเชื้อความน่าเชื่อถือของ PCR สำหรับ HIV คือ 100% จาก 4-5 วัน - ความน่าเชื่อถือคือ 80%

การตรวจ PCR สำหรับ HIV ใช้เวลานานเท่าใด?

ในทางเทคนิค 4-6 ชมแต่ในความเป็นจริงนั้นขึ้นอยู่กับองค์กรของห้องปฏิบัติการและโดยปกติจะทราบผลภายใน 2-3 วัน

PCR สำหรับเอชไอวีในทารกแรกเกิด

เนื่องจากเด็กอายุต่ำกว่า 1.5 ปีที่เกิดจากแม่ที่ติดเชื้อ HIV+ ยังคงรักษาแอนติบอดีต่อ HIV ไว้ จึงเป็นไปไม่ได้ที่จะระบุได้ว่าเด็กติดเชื้อ HIV หรือไม่ใช้ ELISA ในสถานการณ์เช่นนี้ จะใช้ PCR:

  • หากตรวจพบไวรัสในเด็กอายุ 1 เดือนโดยใช้ PCR แสดงว่าติดเชื้อแล้ว
  • หากเด็กมี PCR เชิงลบใน 1-2 เดือน และ 4-6 เดือน หากแม่ไม่ได้ให้นมแม่ เด็กก็จะมีสุขภาพดี

PCR และ ELISA แตกต่างกันอย่างไร?

PCR จะกำหนดไวรัสเอง และ ELISA จะกำหนดปฏิกิริยาของร่างกาย (ในรูปของแอนติบอดี) ต่อไวรัส

PCR ตรวจพบไวรัสได้เร็วกว่า ELISA


อัลกอริธึมใหม่สำหรับการตรวจหาเชื้อ HIV

ยังไม่พบวิธีการรักษาโรคที่เกิดจากไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องในมนุษย์ แต่การวินิจฉัยก็ประสบความสำเร็จอย่างมาก การทดสอบเอชไอวีโดยใช้วิธี PCR เป็นหนึ่งในทางเลือกในการตรวจหาไวรัสในร่างกาย

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสหรือ PCR เป็นหนึ่งในวิธีการที่ทันสมัยในการวินิจฉัยเอชไอวี ขึ้นอยู่กับความสามารถของกรดนิวคลีอิกในการสืบพันธุ์ เซลล์ของสิ่งมีชีวิตใด ๆ รวมถึงโปรตีนและกรดนิวคลีอิก:

  • RNA - กรดไรโบนิวคลีอิก
  • DNA - กรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิก

โมเลกุลขนาดใหญ่เหล่านี้เก็บรหัสพันธุกรรม หากความเข้มข้นของเซลล์ไวรัสในเลือดต่ำ ตัวอย่างจะไม่มีสาย DNA ทั้งหมด แต่มี "หน่วยการสร้าง" ของพวกมัน - นิวคลีโอไทด์ ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสตรวจจับได้แม้กระทั่ง "ชิ้นส่วน" ของเซลล์ไวรัส วิธีนี้ช่วยให้คุณได้รับผลลัพธ์ตั้งแต่เนิ่นๆ หลังจากการติดเชื้อที่เป็นไปได้ เมื่อยังไม่แสดงอาการทางคลินิกแรกๆ

ผลลัพธ์ที่แม่นยำที่สุดสามารถรับได้โดยใช้เลือดดำเพื่อการวิเคราะห์ สองสามวันก่อนสอบ หยุดรับประทานยากระตุ้นภูมิคุ้มกัน 2 สัปดาห์ก่อน

ตัวอย่างวัสดุชีวภาพจะถูกย่อยในเครื่องปฏิกรณ์ในห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ จากนั้นเศษส่วนจะถูกบำบัดด้วยเอนไซม์ รีเอเจนต์จะรวมกับ DNA ของโมเลกุลไวรัสและทำซ้ำ จากเซลล์หนึ่งคุณจะได้ 2 จาก 2 - 4 จากนั้นเป็น 8 จำนวนเพิ่มขึ้นแบบทวีคูณ ปฏิกิริยาลูกโซ่ช่วยให้คุณเพิ่มปริมาณส่วนประกอบของไวรัสได้อย่างรวดเร็วและทำให้ช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการมองเห็นได้

บรรทัดฐานคือผลการทดสอบเชิงลบ ซึ่งมีลักษณะดังนี้: “ไม่พบ DNA ของไวรัส” นี่คือค่าอ้างอิง (ค่าเฉลี่ยทางสถิติ)

ข้อดีและข้อเสียของเทคนิค PCR สำหรับเอชไอวี

การวินิจฉัยเอชไอวีโดยใช้ PCR มีข้อดีที่ปฏิเสธไม่ได้ แต่ก็มีข้อเสียที่สำคัญเช่นกัน ประการแรก ได้แก่:

  • ความแม่นยำสูง. โอกาสที่จะได้รับผลลัพธ์ลบลวงนั้นต่ำมาก
  • ความเก่งกาจ เลือดไม่เพียงเหมาะสำหรับการวิจัยเท่านั้น แต่ยังรวมถึงของเหลวทางชีวภาพอื่นๆ ด้วย (ตกขาว น้ำอสุจิ) น้ำลายและปัสสาวะก็ใช้เช่นกัน แต่ความแม่นยำของผลลัพธ์จะลดลง ในสภาพแวดล้อมเหล่านี้ ความเข้มข้นของเซลล์ไวรัสไม่มีนัยสำคัญ
  • การวิเคราะห์ที่หลากหลาย วัสดุชีวภาพหนึ่งตัวอย่างสามารถทดสอบได้หลายโรค
  • ความเร็วในการดำเนินการ ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสเป็นวิธีการวินิจฉัยแบบเร่งด่วน คุณสามารถหาคำตอบได้ในวันถัดไป
  • ความมั่นใจอยู่ที่ 80% ด้วยวิธี PCR สามารถตรวจจับอนุภาคไวรัสได้แม้ว่าความเข้มข้นจะต่ำก็ตาม ช่วยให้คุณสามารถวินิจฉัยโรคได้ในระยะเริ่มแรกและเริ่มการรักษาได้ทันท่วงที
  • การวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีตั้งแต่เนิ่นๆ เวลาที่ตรวจพบเชื้อ HIV ในเลือดโดยใช้ PCR คือ 10-14 วันหลังจากสงสัยว่าติดเชื้อ นี่เป็นช่วงเวลามาตรฐานในการวินิจฉัยไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่อง ในขั้นตอนนี้ยังตรวจไม่พบ วิธี ELISA ไม่ทำงาน
  • ไม่มีการจำกัดอายุ การทดสอบนี้สามารถดำเนินการกับเด็กได้ตั้งแต่แรกเกิด

ข้อเสียของวิธี PCR ในการวินิจฉัย HIV:

  • ต้นทุนสูงกว่าเมื่อเทียบกับเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์รุ่นที่ 3
  • ต้องใช้อุปกรณ์ทางการแพทย์ที่ทันสมัย
  • ข้อผิดพลาดคือ 20% เนื่องจากความไวของปฏิกิริยาสูง ในกรณีของโรคแพ้ภูมิตัวเอง เนื้องอกเนื้อร้าย การติดเชื้อเรื้อรัง PCR สามารถให้ผลบวกลวงได้

ใครต้องการ PCR?

  • จำเป็นต้องมีการตอบสนองตั้งแต่เนิ่นๆเพื่อการวินิจฉัยเบื้องต้น PCR ช่วยยืนยันหรือหักล้างผลลัพธ์ของ ELISA
  • Immunoblotting ให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวก หากดำเนินการวิเคราะห์ PCR ก่อนจำเป็นต้องยืนยันผลลัพธ์โดยอิมมูโนล็อตติง การวิจัยเป็นการเติมเต็มซึ่งกันและกัน การใช้ 2 วิธีพร้อมกัน แพทย์จะขจัดโอกาสที่จะเกิดข้อผิดพลาด
  • เมื่อได้รับการยืนยันผลบวก PCR จะช่วยติดตามประสิทธิผลของการรักษา
  • ใช้เพื่อตรวจเลือดผู้บริจาคเพื่อดูสถานะ
  • PCR สามารถทำได้แม้ในเด็กอายุต่ำกว่า 1 ปี วิธีการนี้ใช้เพื่อค้นหาสถานะเอชไอวีของทารกแรกเกิดที่มารดาเป็นพาหะของไวรัส การทดสอบที่ดำเนินการในวันแรกของชีวิตจะแสดงให้เห็นว่ามีการติดเชื้อในมดลูกหรือไม่ การติดเชื้ออาจเกิดขึ้นในขณะที่ทารกกำลังผ่านช่องคลอด ทารกได้รับระหว่างการคลอดบุตรสามารถระบุได้หลังจาก 2 - 3 สัปดาห์

การตรวจ PCR ใช้เวลานานแค่ไหน และจะหาได้จากที่ไหน?

การดำเนินการทดสอบ PCR สำหรับเอชไอวีและการถอดรหัสผลลัพธ์ไม่ต้องใช้เวลามาก การเจาะเลือดใช้เวลา 5-7 นาที ในกรณีมาตรฐาน ช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการจะใช้เวลาเพียง 24 ชั่วโมงในการเตรียมใบรับรอง การวินิจฉัยจะใช้เวลาไม่เกิน 8 ชั่วโมง ส่วนที่เหลือจะต้องลงทะเบียน คนไข้จะได้รับรายงานในวันทำการถัดไป ดำเนินการภายใน 2 ชั่วโมง

การตรวจเอชไอวีในลักษณะนี้ไม่ได้ดำเนินการภายใต้กรมธรรม์ประกันสุขภาพภาคบังคับ คุณไม่สามารถรับบริการนี้ได้ฟรีที่คลินิกสาธารณะ แต่ห้องปฏิบัติการเชิงพาณิชย์เกือบทั้งหมดมักจะมีอุปกรณ์และรีเอเจนต์ที่จำเป็น การตรวจ PCR มักรวมอยู่ในการตรวจคัดกรองเอชไอวีโดยทั่วไป ราคาของการวินิจฉัยที่ซับซ้อนมีตั้งแต่ 600 ถึง 1,000 รูเบิล

คุณสามารถดำเนินการตามขั้นตอนให้เสร็จสิ้นโดยไม่เปิดเผยตัวตน ที่แผนกต้อนรับ ผู้ป่วยจะได้รับหมายเลขประจำตัวซึ่งเขาจะทราบผล ศูนย์การแพทย์สมัยใหม่แสดงข้อมูลทั้งหมดบนเว็บไซต์ในบัญชีส่วนตัวของลูกค้า

ข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างวิธีการวินิจฉัยเหล่านี้ก็คือ การตรวจหาไวรัส HIV (AIDS) นั้นมีความแม่นยำมากกว่า เร็วกว่า และจำเป็นสำหรับการวินิจฉัยและการรักษาอย่างเต็มรูปแบบ

แม้ว่าการทดสอบแอนติบอดีจะไม่มีความแม่นยำ แต่ก็มีข้อได้เปรียบที่ไม่อาจปฏิเสธได้ นั่นคือราคาที่ต่ำและเวลาในการผลิตสั้น

  • แพทย์ด้านกามโรคที่มีประสบการณ์มากกว่า 20 ปี
  • การทดสอบเร่งด่วนสำหรับ HIV, ซิฟิลิส, ไวรัสตับอักเสบบี, ไวรัสตับอักเสบซี - 500 รูเบิลสำหรับการติดเชื้อหนึ่งครั้ง การทดสอบจะพร้อม 20 นาที
  • การรักษาไม่ระบุชื่อ - ไม่จำเป็นต้องใช้หนังสือเดินทางของคุณ
  • คลินิกใจกลางกรุงมอสโก 5 นาทีจากสถานีรถไฟใต้ดิน Novokuznetskaya หรือ Tretyakovskaya มีที่จอดรถ

ที่คลินิกโพลีคลินิก +1 การทดสอบแอนติบอดีต่อเอชไอวี (เอดส์) สามารถทำได้ภายใน 20 นาที บริจาคเลือดจากหลอดเลือดดำ ค่าใช้จ่ายในการวิเคราะห์คือ 500 รูเบิล คุณสามารถทำการทดสอบนี้และแบบทดสอบอื่น ๆ ได้โดยไม่ระบุชื่อ

การทดสอบไวรัส HIV (AIDS) เป็นบวกตั้งแต่ 5-7 วัน

การตรวจหาเชื้อไวรัสเอชไอวี (เอดส์) มีผลเป็นบวก เริ่มตั้งแต่ 5-7 วันนับจากวันที่ติดเชื้อ จากนั้นค่อย ๆ เพิ่มเปอร์เซ็นต์การตรวจพบ และถึง 100% ภายใน 30-40 วัน

ควรสังเกตว่าในระยะแรกของการติดเชื้อ คุณสามารถป้องกันการติดเชื้อเอชไอวีได้ การป้องกันนี้ได้รับการทดสอบอย่างดีในหญิงตั้งครรภ์ที่ติดเชื้อเอชไอวีที่คลอดบุตร จากการป้องกันดังกล่าว เด็ก 3 ใน 4 คนเกิดมามีสุขภาพแข็งแรง

การทดสอบไวรัส HIV (AIDS) ดำเนินการในสองเวอร์ชัน:

  • การตรวจหาเชื้อเอชไอวี (เอดส์) (ผลบวก-ลบ)
  • การตรวจหาเชื้อเอชไอวี (เอดส์) ด้วยการทดสอบความเข้มข้น (หากการทดสอบเป็นบวกจะกำหนดปริมาณไวรัสในเลือด 1 มิลลิลิตร) การทดสอบนี้เป็นมาตรฐานทองคำสำหรับการวินิจฉัย

ระยะเวลาในการตรวจหาไวรัส HIV (AIDS) อยู่ระหว่าง 3 ถึง 10 วัน

การทดสอบแอนติบอดี (ELISA) ต่อเอชไอวี (เอดส์) ขึ้นอยู่กับสภาพของร่างกายและเริ่มปรากฏในรูปแบบของผลลัพธ์ที่เป็นบวกหลังจาก 2-3 สัปดาห์ ความน่าจะเป็นสูงสุดในการตรวจพบการวิเคราะห์ดังกล่าวอาจนานถึง 6 เดือนหลังการติดเชื้อ . เมื่อค้นหาแอนติบอดีต่อเอชไอวี (เอดส์) ปฏิกิริยาจะดำเนินการในห้องปฏิบัติการปกติในกรณีของการทดสอบเชิงบวก เลือดจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการเอชไอวีเฉพาะทาง ในกรณีนี้ผู้ป่วยจะได้รับแจ้งว่าเลือดจะคงอยู่ประมาณ 10-15 วัน มีเพียงห้องปฏิบัติการเอชไอวีเฉพาะทางเท่านั้นที่สามารถให้ข้อสรุปเกี่ยวกับการทดสอบแอนติบอดีต่อไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ได้ในเชิงบวก

ที่คลินิกโพลีคลินิก +1 การทดสอบแอนติบอดีต่อเอชไอวีสามารถทำได้ภายใน 20 นาที โดยจะดึงเลือดจากหลอดเลือดดำ

ค่าใช้จ่ายในการวิเคราะห์ดังกล่าว 500 รูเบิล. คุณสามารถผ่านการทดสอบนี้และแบบทดสอบอื่นๆ ได้เต็มจำนวน ไม่ระบุชื่อ.

เรากำลังรอคุณอยู่ที่คลินิกของเรา

.

การติดเชื้อเอชไอวีเป็นโรคไวรัสที่รุนแรงโดยไม่มีอาการเป็นเวลานานโดยมีความเสียหายต่อระบบภูมิคุ้มกันของมนุษย์และเป็นอันตรายเนื่องจากการวินิจฉัยล่าช้า คำว่า “HIV” และ “AIDS” มักใช้แทนกันได้ โดยแท้จริงแล้ว โรคเอดส์ถือเป็นระยะสุดท้าย (สุดท้าย) ของการติดเชื้อ HIV ซึ่งกินเวลาประมาณ 1-2 ปี จากการวิจัยพบว่าตั้งแต่เกิดการติดเชื้อจนถึงโรคเข้าสู่ระยะสุดท้ายหากไม่มีการรักษา โดยเฉลี่ยจะผ่านไปประมาณ 9-11 ปี การวินิจฉัยโรคในระยะเริ่มแรกโดยใช้การวิเคราะห์ ELISA หรือ PCR สำหรับเอชไอวีช่วยให้คุณสามารถเริ่มการรักษาด้วยยาต้านไวรัสได้ทันท่วงที หยุดการลุกลามของโรค และมีชีวิตที่สมบูรณ์เป็นเวลาหลายปีแม้ว่าจะมีไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์อยู่ในร่างกายก็ตาม

เส้นทางการแพร่เชื้อเอชไอวี:

  • การมีเพศสัมพันธ์ที่ไม่มีการป้องกัน
  • การถ่ายเลือดและผลิตภัณฑ์จากเลือด
  • การใช้เครื่องมือที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อในระหว่างการแทรกแซงทางการแพทย์
  • การบาดเจ็บต่อบุคลากรทางการแพทย์ด้วยเครื่องมือที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ
  • การติดเชื้อปริกำเนิด: การแพร่เชื้อไวรัสระหว่างตั้งครรภ์และการคลอดบุตร

กำหนดการทดสอบโรคเอดส์ (HIV):

  • ในระหว่างการมีเพศสัมพันธ์แบบไม่เป็นทางการ
  • เมื่อวางแผนการตั้งครรภ์และระหว่างตั้งครรภ์
  • เพื่อเตรียมตัวเข้ารักษาในโรงพยาบาล
  • ด้วยการลดน้ำหนักอย่างกะทันหัน
  • ด้วยอุณหภูมิร่างกายที่เพิ่มขึ้นเป็นเวลานานโดยไม่ทราบสาเหตุ

การตรวจเลือดอย่างรวดเร็วสำหรับเอชไอวี

HIV อยู่ในตระกูล retroviruses (Retroviridae) ซึ่งเป็นวงศ์ย่อยของ lentiviruses (Lentivirus) เมื่อเข้าสู่ร่างกายมนุษย์ จะส่งผลต่อเซลล์ของระบบภูมิคุ้มกัน ได้แก่ เซลล์ทีเฮลเปอร์ เซลล์มาโครฟาจ และเซลล์เดนไดรติก รีโทรไวรัสจะเปลี่ยน RNA ของมันให้กลายเป็นชิ้นส่วนของ DNA ซึ่งรวมเข้ากับจีโนมของเซลล์เจ้าบ้าน เมื่อเซลล์ที่ได้รับผลกระทบแบ่งตัว เซลล์ลูกสาวจะได้รับจีโนมของไวรัส ร่างกายผลิตแอนติบอดีต่อแอนติเจนของไวรัสบนพื้นผิวของเซลล์ที่ติดเชื้อ การตรวจหาแอนติบอดีนั้นใช้ในการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวีโดยใช้วิธี Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) ขอแนะนำให้ทำการทดสอบ 1.5 - 3 เดือนหลังจากช่วงเวลาที่สงสัยว่าติดเชื้อ ก่อนหน้านี้ การทดสอบ ELISA ไม่ได้ให้ข้อมูล ห้องปฏิบัติการ Gemotest ใช้วิธีการอื่นคือ Real-Time PCR (PCR พร้อมการตรวจจับผลิตภัณฑ์แบบเรียลไทม์) ซึ่งตรวจไม่พบแอนติบอดีต่อ HIV แต่เป็นไวรัสในร่างกาย ด้วยความไวและความน่าเชื่อถือสูง วิธีการนี้ช่วยให้คุณตรวจจับไวรัสได้แม้แต่อนุภาคเดียวหลังจากผ่านไป 10 วัน (โดยเฉลี่ย) นับจากช่วงเวลาที่อาจเกิดการติดเชื้อ เมื่อยังไม่มีแอนติบอดีในเลือด
  • เพื่อตรวจจับไวรัสในช่วง “หน้าต่างซีโรเนกาทีฟ”;
  • หากผลอิมมูโนล็อตเป็นที่น่าสงสัย
  • เพื่อตรวจสอบจีโนไทป์ของไวรัส - HIV-1 หรือ HIV-2;
  • เพื่อควบคุมปริมาณไวรัสในร่างกาย
  • เพื่อระบุสถานะเอชไอวีของทารกแรกเกิดหากแม่ติดเชื้อเอชไอวี
  • หลังจากการถ่ายเลือด

การทดสอบเอชไอวีโดยไม่ระบุชื่อ

ตามข้อ 2 ข้อ 8 ของกฎหมายของรัฐบาลกลางแห่งสหพันธรัฐรัสเซียหมายเลข 38-FZ ผู้ป่วยสามารถทำการทดสอบ HIV โดยไม่ระบุชื่อและรับผลโดยใช้หมายเลขคำสั่งซื้อส่วนบุคคลซึ่งไม่ต้องเปิดเผย สำหรับผู้ที่ไม่สามารถมาตรวจที่แผนกใดแผนกหนึ่งของ Hemotest Laboratory ได้ด้วยเหตุผลบางประการ เราขอแนะนำให้ใช้บริการของพยาบาลที่มาเจาะเลือด แล้วลงทะเบียนตัวอย่างที่นำมาโดยไม่ระบุชื่อ

ดึงความสนใจของคุณไปที่:ผลการทดสอบโรคเอดส์ (HIV) โดยไม่ระบุชื่อไม่สามารถใช้สำหรับการตรวจทางวิชาชีพ การพักรักษาในโรงพยาบาล หรือการจัดหาแพทย์ที่เข้ารับการรักษาในคลินิกได้

ผลการตรวจเอชไอวีโดยไม่คำนึงถึงผลลัพธ์จะออกก็ต่อเมื่อผู้ป่วยติดต่อแผนกห้องปฏิบัติการเป็นการส่วนตัว เมื่อตรวจสอบผู้เยาว์ (อายุต่ำกว่า 14 ปี) - ไปยังตัวแทนทางกฎหมายที่ระบุในคำสั่ง

ผลลัพธ์จะออกเมื่อมีการนำเสนอสัญญา การประมาณการ และเอกสารประจำตัวของผู้ป่วยเองหรือตัวแทนของผู้ป่วยที่ระบุไว้ในคำสั่ง

ผลการวิจัยไม่ได้รับการสื่อสารทางโทรศัพท์หรืออีเมล

หากมีการกำหนดการทดสอบ HIV เพื่อวัตถุประสงค์ในการเตรียมตัวสำหรับการรักษาในโรงพยาบาลหรือเพื่อการจัดหาในสถานพยาบาล การลงทะเบียนการสมัครจะต้องดำเนินการภายใต้ข้อกำหนดบังคับโดยผู้ป่วยของข้อมูลต่อไปนี้:

1) สำหรับผู้พักอาศัยในมอสโกและภูมิภาคมอสโก

  • ชื่อเต็ม
  • วัน เดือน และปีเกิด
  • ข้อมูลการลงทะเบียน
  • หนังสือเดินทาง
  • กรมธรรม์ประกันภัย (ชุดและหมายเลขกรมธรรม์ ชื่อบริษัทประกันภัย)
2) สำหรับผู้ที่อาศัยอยู่ในภูมิภาคอื่น ๆ ของสหพันธรัฐรัสเซียและพลเมืองต่างประเทศ - สำเนา (สแกน) หนังสือเดินทางเพิ่มเติม
  • ชื่อเต็ม
  • วัน เดือน และปีเกิด
  • ข้อมูลการลงทะเบียน
  • กรมธรรม์ประกันภัย (ชุดและหมายเลขกรมธรรม์ ชื่อบริษัทประกันภัย)
  • สำเนา (สแกน) หนังสือเดินทาง

การตรวจหาเชื้อ HIV ใช้เวลานานแค่ไหน?

สามารถทราบผลการตรวจ ELISA ได้ภายใน 1 วันทำการ แต่ต้องไม่เร็วกว่า 1.5-3 เดือน นับจากวันที่สงสัยว่าติดเชื้อ สามารถทราบผลการวินิจฉัย PCR ได้ภายใน 10 วัน นับจากวันที่สงสัยว่าติดเชื้อ ระยะเวลาดำเนินการสำหรับการทดสอบ PCR แบบเรียลไทม์คือ 3 วันทำการ

สิ่งพิมพ์ที่เกี่ยวข้อง