Tests de dépistage du VIH, du SIDA. Comment se faire tester pour le VIH PCR ? Tests d'infection au VIH et PCR

Description

La réaction en chaîne par polymérase (PCR) a été inventée en 1983 par le biochimiste américain Carey B. Mullis. En 1993, il reçut le prix Nobel pour cette découverte.

Aujourd'hui, les domaines d'application de la PCR en tant que méthode moderne de biologie moléculaire sont extrêmement vastes. Le diagnostic PCR occupe une place particulière dans la pratique médicale. Et la raison en est très simple : la réaction en chaîne par polymérase rend possible l’impossible.

Les diagnostics PCR sont souvent décrits au sens figuré comme une méthode par laquelle vous pouvez trouver une aiguille dans une botte de foin, puis construire une botte de foin à partir de ces aiguilles. L'« aiguille » est un minuscule morceau du matériel génétique d'une cellule (ADN ou ARN).

Ainsi, la découverte de cette méthode constitue l’un des événements les plus remarquables dans le domaine de la biologie moléculaire des dernières décennies. Le développement de la méthode PCR a permis au diagnostic médical en général d'atteindre un niveau qualitativement nouveau.

Bases de la PCR

La base de la méthode est la copie sélective répétée (amplification) d'une certaine section d'ADN afin d'obtenir une quantité de matériel génétique suffisante pour la détection visuelle. Dans ce cas, seule une section donnée d'ADN est copiée (amplifiée) plusieurs fois, à condition qu'elle soit présente dans le biomatériau étudié.

De plus, la recherche, en plus de simplement augmenter le nombre de copies de coupes d’ADN, permet d’autres manipulations du matériel génétique. Ainsi, la méthode est largement utilisée dans la recherche scientifique, la pratique biologique et médicale : dans le diagnostic des maladies infectieuses et héréditaires, dans l'identification de mutations, le génotypage, l'établissement de paternité, l'identification personnelle, etc.

PCR dans le diagnostic des maladies infectieuses

Aujourd’hui, le diagnostic des infections par PCR constitue l’une des méthodes de laboratoire clinique les plus précises, les plus sensibles et les plus efficaces. De plus, la gamme d'agents pathogènes détectés est pratiquement illimitée : un système de test pour l'analyse PCR de l'agent pathogène souhaité serait développé.

En raison de sa haute sensibilité, la PCR permet d'identifier l'agent pathogène même avec son contenu minimal (c'est-à-dire que seules quelques molécules de son ADN sont présentes dans le biomatériau étudié).

La PCR détecte les agents pathogènes des maladies infectieuses lorsque cela ne peut être réalisé par d'autres méthodes (immunologiques, culturelles, microscopiques). Par conséquent, pour un certain nombre d'agents infectieux, la méthode de réaction en chaîne par polymérase est devenue la « référence », elle a fait ses preuves et a été testée cliniquement. Dans le diagnostic moderne des maladies infectieuses en laboratoire, la PCR est la méthode la plus sensible et la plus spécifique pour la détection directe des agents pathogènes. Cela permet non seulement d'établir l'étiologie de la maladie, mais également de suivre l'évolution du processus infectieux et d'évaluer l'efficacité du traitement.

Le dépistage des IST par PCR est particulièrement pertinent en cas d'évolution asymptomatique du processus infectieux provoqué par des micro-organismes inconditionnellement pathogènes (Chlamydia, détermination qualitative de l'ADN ; Mycoplasmes, détermination qualitative de l'ADN ; Agent gonorrhéique, détermination qualitative de l'ADN ; Agent Trichomonose, détermination qualitative de l'ADN). . Par exemple, avec la gonorrhée chronique chez les femmes, même en utilisant la méthode bactériologique, il n'est souvent pas possible d'identifier le gonocoque, malgré les symptômes existants d'un processus inflammatoire chronique du col de l'utérus ou de l'urètre.

Les diagnostics PCR modernes permettent non seulement d'identifier le matériel génétique des agents infectieux, mais également de déterminer leurs concentrations d'ADN/ARN (format de recherche quantitative). La détermination du nombre d'agents pathogènes est importante pour décider du traitement, surtout si des micro-organismes opportunistes sont identifiés (Mycoplasmes, dosage quantitatif de l'ADN ; typage Ureaplasma, dosage quantitatif de l'ADN).

L'une des principales orientations du développement de la méthode PCR est le format « Multiprime » développé au CMD, qui permet de détecter plusieurs agents pathogènes dans un seul tube à essai (et une seule réaction).

• Agents pathogènes des infections transmises par les tiques ixodides

Diagnostic PCR de l'hépatite

Actuellement, on connaît au moins 5 virus dont la capacité à provoquer des lésions hépatiques a été prouvée. Ce sont les agents responsables de l'hépatite A, B, C, D, E. Dans de rares cas, l'hépatite peut être causée par les virus d'Epstein-Barr et de l'herpès simplex. La capacité d’agents tels que les virus du TT et de l’hépatite G à infecter le foie n’est pas aujourd’hui reconnue par tout le monde. Tous ces virus appartiennent à des familles différentes, ont des propriétés biologiques différentes et, par conséquent, les tactiques de traitement diffèrent également considérablement en fonction de l'étiologie de l'hépatite.

Compte tenu de ce qui précède, un problème très urgent est le diagnostic étiologique adéquat de l'hépatite virale avec l'identification d'un agent pathogène spécifique. Cela est impossible sans l’utilisation de méthodes modernes de biologie moléculaire. Par conséquent, le diagnostic de l'hépatite à l'aide de la méthode de réaction en chaîne par polymérase est l'une des étapes les plus importantes pour établir la cause de la maladie et déterminer d'autres tactiques de traitement.

PCR dans le diagnostic de l'infection par le VIH

Actuellement, pour le diagnostic en laboratoire de l'infection par le VIH, l'approche la plus accessible et en même temps la plus sensible est utilisée - détection des anticorps anti-VIH dans le sang à l'aide d'un test immuno-enzymatique (ELISA) - suivie de la confirmation des résultats positifs du analyse par immunoblot (IB). L'efficacité de l'identification des personnes infectées par le VIH à l'aide de cette approche peut atteindre 99 % ou plus.

Mais le diagnostic sérologique de l'infection par le VIH présente un certain nombre de limites :

1. Inefficacité pendant la période dite « fenêtre sérologique » (dans les premières semaines après l'infection, les anticorps ne sont pas détectés en raison de leur absence ou de leur faible concentration).
2. Des anticorps anti-VIH sont détectés depuis longtemps chez tous les enfants nés de mères infectées par le VIH.
3. Résultats ELISA faussement positifs en raison de la présence dans le sang d'anticorps dirigés contre des antigènes similaires aux antigènes du VIH.
4. Résultats faussement négatifs et douteux de l'ELISA et de l'immunoblot (en particulier chez les patients au stade terminal de la maladie).

C’est pourquoi les tests PCR pour le dépistage de l’infection par le VIH sont désormais de plus en plus utilisés. Selon les « Recommandations méthodologiques pour le dépistage de l'infection par le VIH » (approuvées par le Ministère de la Santé et du Développement social de la Fédération de Russie le 06/08/2007) « s'il existe des critères épidémiologiques indiquant un risque récent d'infection par le VIH pour les patients et à en même temps, des résultats vraisemblablement faussement positifs ou faussement négatifs en ELISA et IB, par exemple. Lors de l'examen d'enfants nés de mères infectées par le VIH ou de patients pendant la période de « fenêtre séronégative », la méthode PCR est utilisée, qui détecte le VIH matériel génétique… » Et dans le cas d'un diagnostic d'infection par le VIH déjà établi, l'analyse PCR est utilisée pour le pronostic, l'observation dynamique et le suivi du traitement.

• Virus de l'immunodéficience humaine, détermination qualitative de l'ADN du provirus, PCR
• Détermination quantitative de l'ARN du virus de l'immunodéficience humaine, PCR
• Diagnostic complet : détermination qualitative de l'ARN du virus de l'hépatite C/de l'ADN du virus de l'hépatite B/de l'ARN du virus de l'immunodéficience humaine (VIH) de types 1 et 2

Au Centre de Diagnostic Moléculaire (CMD), vous pouvez passer un test PCR pour le VIH de manière anonyme.

La PCR (réaction en chaîne par polymérase) est une méthode de génétique moléculaire qui vous permet d'analyser n'importe quelle courte séquence d'ADN (ou d'ARN), même dans des échantillons contenant seulement d'infimes quantités d'ADN ou d'ARN, déterminant ainsi la présence/l'absence d'un agent pathogène (à déterminer, par exemple, s'il existe un VIH humain, un virus de l'hépatite B ou Mycobacterium tuberculosis). La PCR est utilisée pour reproduire/multiplier/cloner (amplifier) ​​des sections sélectionnées d’ADN ou d’ARN à des fins d’analyse.

La méthode PCR est si simple que même un écolier peut la faire)

Auparavant, l’amplification de l’ADN impliquait le clonage de segments d’intérêt dans des vecteurs d’expression bactériens et prenait des semaines. Mais maintenant que la PCR se fait dans des tubes à essai, cela ne prend que quelques heures. La PCR est très efficace, de sorte qu'un grand nombre de copies peuvent être réalisées à partir de l'ADN.

Séquence d'ADN et correspondance nucléotidique.

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De plus, la PCR utilise les mêmes molécules que celles utilisées par la nature pour copier l’ADN :

• Deux « amorces », de courtes séquences d'ADN simple brin qui sont synthétisées pour correspondre au début et à la fin de la séquence d'ADN à copier.
• Une enzyme appelée polymérase qui se déplace le long d’un segment d’ADN, lit son code et en assemble une copie.
• Un tas de blocs d'ADN que cette polymérase doit fabriquer.

Autrement dit, la PCR est une technique dans laquelle des particules d'ADN (parfois de l'ARN) sont multipliées dans une certaine solution ou sur une surface spéciale où elles peuvent être déposées.

La PCR est une technique qui permet aux scientifiques de trouver une aiguille dans une botte de foin, puis de construire une botte de foin à partir de ces aiguilles.

la tâche de la PCR en tant que méthode est de les multiplier (d'amplifier), d'en faire autant de copies que possible afin qu'il soit possible d'identifier à qui ils peuvent appartenir (une personne spécifique, un animal ou un organisme pathogène), même s'il n'y a que traces de présence d’ADN/ARN.

Cependant, l’amplification PCR ne constitue qu’une partie du test diagnostique. Après amplification, les segments amplifiés doit être comparé à d’autres segments nucléotidiques, mais d'une source bien connue(par exemple, une personne, un animal ou un organisme pathogène spécifique). Cette comparaison de segments uniques est souvent effectuée en plaçant des séquences nucléotidiques générées par PCR à côté de séquences nucléotidiques connues provenant d'humains, d'agents pathogènes ou d'autres sources dans un gel spécial.

Lorsqu'un courant électrique traverse le gel, les différentes séquences nucléotidiques forment des bandes qui ressemblent à une « échelle » selon leur charge électrique et leur taille moléculaire. C'est ce qu'on appelle l'électrophorèse sur gel. Ils migrent aux mêmes niveaux dans le gel, montrant l'identité des séquences nucléotidiques. Cette méthode est l’un des tests PCR de stade avancé les plus populaires.

Comment fonctionne la PCR ?

En 1983, Kari Mullis a développé les étapes de base pour amplifier les séquences d'ADN. Lui et Michael Smith ont reçu le prix Nobel pour le développement de la PCR en 1993.

La PCR est réalisée dans un tube à essai avec les produits chimiques appropriés et à une certaine température de chauffage.

Les réactifs ou produits chimiques suivants sont requis :

• Un échantillon contenant une séquence nucléotidique (provenant du sang, des cheveux, du pus, de la peau, etc.).
• Amorces d'ADN : ADN simple brin court attaché à des séquences nucléotidiques qui favorisent la synthèse d'un brin complémentaire de nucléotides.
• ADN polymérase : enzyme qui, lorsque l'ADN se lie à une amorce, descend dans le fragment d'ADN en ajoutant des éléments constitutifs de l'ADN pour former des paires de bases complémentaires et synthétise ainsi la chaîne nucléotidique complémentaire de l'ADN (introduction de l'ADN polymérase thermostable, Taq polymérase, dérivée provenant de bactéries résistantes à la chaleur, améliore considérablement la capacité de PCR).
• Un excès important d'éléments constitutifs de l'ADN appelés nucléotides (adénine, thymidine, cytosine et guanine, abrégés respectivement : A, T, C et G) en solution. Lorsque ces blocs sont réunis, ils forment une séquence nucléotidique ou un seul brin d’ADN. Lorsque ces éléments constitutifs se lient à leur élément constitutif complémentaire avec des liaisons hydrogène faibles (par exemple, A se liera uniquement à T et G ne se liera qu'à C), une séquence nucléotidique d'ADN complémentaire se forme et est liée à l'ADN simple brin d'origine. Une fois la liaison terminée, un ADN double brin complémentaire se forme dans une séquence spécifique.

Kari Mullis est un gars très intéressant et cool, regardez comme il parle de façon intéressante de la façon dont il a inventé le PCR :

Il croit en l'astrologie, mais ne croit pas que le VIH cause le SIDA.)

La réaction en chaîne par polymérase commence alors par un segment d'ADN de l'échantillon, qui est placé dans un tube contenant les réactifs ci-dessus. La solution est chauffée à 94°C. Le chauffage brise les liaisons hydrogène qui permettent aux brins d’ADN complémentaires de se former, de sorte que seuls des brins simples existent dans le mélange (c’est ce qu’on appelle la dénaturation de l’ADN double brin).

On laisse le mélange refroidir jusqu'à 54°C. À cette température, les amorces d’ADN et l’ADN polymérase se lient à l’ADN simple brin individuel (c’est ce qu’on appelle l’hybridation de l’ADN). Étant donné que les éléments constitutifs sont en excès (forte concentration) dans le mélange, la polymérase les utilise pour créer de nouveaux brins complémentaires d'ADN (appelé extension d'ADN), et ce processus se produit plus rapidement à 72 °C. Ce processus crée une nouvelle molécule d'ADN double brin à partir de chacun des simples brins de la molécule d'origine.

Ce cycle est répété environ 40 fois dans une machine appelée cycleur thermique, qui répète automatiquement les cycles de chauffage-refroidissement, la quantité de chaque séquence d'ADN doublant à chaque fois que le cycle de chauffage-refroidissement est terminé. Ce qui n’était à l’origine qu’un court segment d’ADN pourrait être étendu à environ 100 milliards de copies après 40 cycles de doublement.

Quand un test PCR est-il nécessaire ?

Le test PCR constitue la base d'un certain nombre de tests pouvant répondre à de nombreuses questions médicales différentes qui aident les médecins à diagnostiquer et à traiter les patients. Par exemple, les tests PCR peuvent détecter et identifier les organismes pathogènes chez les patients, en particulier ceux qui sont difficiles à cultiver (par ex. VIH et autres virus et certains champignons).

Certains médecins prescrivent des tests PCR pour aider au diagnostic maladies génétiques, tandis que d'autres médecins utilisent la PCR pour détecter des relations biologiques telles que identification des parents des enfants. Les tests PCR sont également utilisés pour l'identification et la caractérisation mutations génétiques et réarrangements constatés à certains maladies cancéreuses.

Cependant, les tests PCR ont été modifiés et introduits dans de nombreux aspects de la recherche scientifique, notamment la biologie évolutive, les empreintes génétiques, la recherche médico-légale et bien d’autres.

Qu’est-ce que la RT-PCR ?

La PCR par transcriptase inverse (RT-PCR) est un test PCR conçu pour détecter et mesurer la quantité d'ARN. Bien que les premiers tests PCR aient amplifié l’ADN, de nombreux virus et autres composants biologiques (tels que les mitochondries) utilisent l’ARN comme matériel génétique. La RT-PCR diffère de la PCR classique en prenant d’abord l’ARN et en transformant le brin d’ARN en brin d’ADN. Cela se fait essentiellement avec la même méthode de PCR décrite ci-dessus, sauf en utilisant une enzyme appelée transcriptase inverse au lieu de l'ADN polymérase.

La transcriptase inverse permet de convertir un brin d’ARN en un brin complémentaire d’ADN. Une fois cette réaction effectuée, la méthode PCR de routine peut alors être utilisée pour amplifier l’ADN. La RT-PCR est utilisée pour détecter et étudier de nombreux virus à ARN. La RT-PCR ne doit pas être confondue avec une autre variante de la PCR appelée PCR en temps réel.

La PCR en temps réel est une variante de la PCR qui permet l'analyse de l'ADN amplifié dans les 40 cycles habituels de la procédure. Bien que la procédure soit similaire à la PCR cyclique conventionnelle, la PCR en temps réel utilise des colorants fluorescents attachés à certains éléments constitutifs ou à de petits brins de nucléotides. Selon la méthode utilisée, la fluorescence se produit lorsque des brins d'ADN amplifiés se forment. La quantité de fluorescence peut être mesurée sur 40 cycles et permet aux chercheurs de mesurer des produits spécifiques et leurs quantités pendant les cycles d'amplification.

Cela permet souvent aux chercheurs ou aux techniciens d'éviter l'électrophorèse sur gel ou d'autres procédures secondaires requises pour analyser les produits de PCR, fournissant ainsi des résultats plus rapides. La PCR en temps réel et la RT-PCR sont des variantes ou des modifications du test PCR original. Cependant, il existe de nombreuses autres options (au moins 25) qui sont utilisées pour résoudre des problèmes spécifiques. Ils portent tous des noms différents tels que PCR d'assemblage, PCR à démarrage à chaud, PCR multiplex, PCR à semi-conducteurs et bien d'autres.

Qu'est-ce qu'un test PCR pour le VIH ?

RAP(réaction en chaîne par polymérase) - une méthode de multiplication du matériel génétique d'un virus, un test qui détermine le matériel génétique du virus- ARN ou ADN du VIH.

Si le virus est contenu en quantité minimale, cette quantité augmente plusieurs fois à la suite de la réaction. La PCR a donc une valeur diagnostique élevée.

Généralement, ce test est utilisé pour déterminer VIH dans les dons de sang ou pour la détection précoce du VIH dans l’organisme avant la production d’anticorps spécifiques contre le VIH. Les anticorps spécifiques sont détectés par les tests VIH conventionnels (ELISA), mais seulement 1 à 3 mois, rarement 12 mois après l'infection. UN en utilisant la PCR, vous pouvez donner une réponse assez précise après 14 jours avec 98% de confiance et même après 5 jours, mais alors la confiance sera de 80%. La PCR du VIH est un test coûteux et plus exigeant en main-d'œuvre que l'ELISA. Tout le monde ne l'utilise pas, mais uniquement pour des indications particulières (donneurs ayant subi un accident médical avec une personne infectée par le VIH) ou contre rémunération.

Test PCR qualitatif pour le VIH— détermine si le virus VIH-1/VIH-2 est présent ou non, mais il ne détermine pas le nombre de copies du virus (la PCR quantitative est utilisée pour déterminer le nombre). Une PCR de haute qualité n’est PAS réalisée pour les personnes ayant un diagnostic connu d’infection par le VIH. Son Ils ne le font qu'à ceux qui ne savent pas encore s'ils sont infectés par le VIH ou non.

Il s'agit d'une méthode permettant de déterminer la région d'ADN complémentaire dans le génome d'une cellule lymphocytaire affectée par le VIH. Ceux. Ce n’est pas le virus lui-même qui est déterminé, mais le matériel que le virus intègre dans la cellule. Son ADN sera déjà stocké dans le noyau de la cellule, à partir duquel il sera ensuite lu et multiplié (se copier).

Test PCR quantitatif pour le VIH

Analyse PCR quantitative pour l'ARN du VIH— détermine le nombre de copies du virus à ARN dans le sang (la PCR ADN est utilisée pour déterminer le virus dans les cellules, par exemple chez les enfants). Uniquement effectué sur les personnes infectées par le VIH, pour surveiller le traitement, déterminer la gravité du processus pathologique et l'efficacité du traitement.

Combien de temps après l’infection le VIH peut-il être détecté par la méthode PCR ?

Combien de jours plus tard puis-je passer un test PCR VIH après un contact avec un partenaire séropositif ?

Le VIH peut être détecté par PCR 4 à 14 jours après l’infection. Un résultat PCR négatif pour le VIH est fiable 14 jours après un contact à risque, mais selon la réglementation en vigueur, un test à l'aide de est toujours requis.

En quoi la PCR ADN est-elle différente de la PCR ARN VIH ?

ARN généralement utilisé dans les tests quantitatifs pour évaluer la charge virale chez les individus diagnostiqués, par exemple pour évaluer l'efficacité d'un traitement.

ADN- dans les cellules mononucléées, par exemple pour le diagnostic chez l'enfant, où les anticorps maternels anti-VIH empêchent l'utilisation de la méthode ELISA.

Les deux tests peuvent être à la fois quantitatifs et qualitatifs.

Les deux peuvent être utilisés dans des cas particuliers pour le diagnostic, mais en tenant compte des limitations spécifiques imposées par les paramètres techniques du système, c'est-à-dire comme prescrit par un médecin.

La PCR VIH peut-elle être faussement positive, raisons ?

Si c'est bien fait: l'infirmière n'a pas mélangé les tubes, a regardé le passeport avant de prélever du sang, a correctement étiqueté le tube, a écrit correctement les instructions, etc., et le spécialiste du laboratoire (généralement un laborantin) a tout fait selon les instructions, il répondait à toutes les exigences de la réglementation du laboratoire (par exemple, le biomatériau a été correctement « excavé », sans contamination croisée (contamination), etc.) et un système de test de haute qualité a été utilisé, ALORS la PCR PEUT être faussement positive seulement dans 2 % de cas (cela est dû à la sensibilité des systèmes de tests utilisés) .

Mais si des erreurs ont été commises par le personnel médicalétablissements , ALORS la PCR peut être faussement positive dans plus de 2% des cas.

Comment se déroule le test PCR du VIH ?

Pour tester le VIH par PCR, le sang est prélevé dans une veine, de préférence (mais pas nécessairement) le matin à jeun.

Où puis-je me faire tester pour le VIH PCR ?

Pour ce faire, saisissez " faire un test PCR VIH" et ajoutez votre localité à la demande et vous verrez les organisations engagées dans la recherche PCR dans votre région.

Par exemple,

Combien coûte un test PCR VIH ?

Près 1,5 à 3 000 roubles. selon la région.

Quelle est la fiabilité des résultats d’un test PCR pour le VIH ?

À travers 14 jours après l'infection, la fiabilité de la PCR pour le VIH est de 100 %, de 4 à 5 jours - la fiabilité est de 80 %.

Combien de temps faut-il pour réaliser un test PCR pour le VIH ?

Techniquement 4-6 heures, mais en réalité cela dépend de l'organisation du laboratoire et généralement le résultat est donné en 2-3 jours.

PCR pour le VIH chez un nouveau-né

Étant donné qu'un enfant de moins d'un an et demi né d'une mère séropositive conserve ses anticorps contre le VIH, il est impossible de déterminer si l'enfant est infecté par le VIH ou non par ELISA. Dans cette situation, la PCR est utilisée :

• Si un virus est détecté chez un enfant de 1 mois par PCR, cela signifie qu'il a été infecté.
• Si un enfant a un PCR négatif à 1-2 mois et 4-6 mois, à condition que la mère ne l'ait pas nourri avec son lait maternel, l'enfant est en bonne santé.

Quelle est la différence entre PCR et ELISA ?

La PCR détermine le virus lui-même et l’ELISA détermine la réaction du corps (sous forme d’anticorps) au virus.

La PCR détecte la présence du virus plus rapidement que l'ELISA.

Aucune méthode de traitement de la maladie causée par le virus de l’immunodéficience humaine n’a encore été trouvée. Mais les diagnostics ont connu de sérieux succès. Un test VIH réalisé à l'aide de la méthode PCR est l'une des options permettant de détecter le virus dans le corps.

La réaction en chaîne par polymérase, ou PCR, est l'une des méthodes modernes de diagnostic du VIH. Elle repose sur la capacité des acides nucléiques à se reproduire. La cellule de tout organisme vivant comprend des protéines et des acides nucléiques :

• ARN - acide ribonucléique,
• ADN - acide désoxyribonucléique.

Ces macromolécules stockent le code génétique. Si la concentration de cellules virales dans le sang est faible, l'échantillon ne contient pas de chaînes d'ADN entières, mais leurs « éléments constitutifs » individuels - les nucléotides. La réaction en chaîne par polymérase détecte même ces « fragments » de cellules virales. Cela permet d’obtenir des résultats rapidement après une éventuelle infection, alors que les premiers symptômes cliniques ne sont pas encore apparus.

Le résultat le plus précis peut être obtenu en utilisant du sang veineux pour analyse. Quelques jours avant de subir l'examen. Arrêtez de prendre des médicaments immunostimulants 2 semaines avant.

Un échantillon de biomatériau est digéré dans un réacteur de laboratoire médical. Les fractions sont ensuite traitées avec des enzymes. Les réactifs se combinent à l’ADN de la molécule virale et la dupliquent. À partir d'une cellule, vous obtenez 2, de 2 à 4, puis 8. Le nombre augmente de façon exponentielle. La réaction en chaîne permet d'augmenter rapidement la quantité du composant viral et de le rendre visible aux techniciens de laboratoire.

La norme est un résultat de test négatif, qui ressemble à ceci : « Aucun ADN viral détecté ». Il s'agit de la valeur de référence (moyenne statistique).

Avantages et inconvénients de la technique PCR pour le VIH

Le diagnostic du VIH par PCR présente des avantages indéniables, mais présente également des inconvénients importants. Les premiers comprennent :

• Haute précision. La probabilité d’obtenir des résultats faussement négatifs est extrêmement faible.
• Polyvalence. Non seulement le sang convient à la recherche, mais également d'autres fluides biologiques (écoulements vaginaux, sperme). La salive et l'urine sont également utilisées, mais la précision du résultat sera moindre. Dans ces environnements, la concentration de cellules virales est insignifiante.
• Large gamme d'analyses. Un échantillon de biomatériau peut être testé pour plusieurs maladies.
• Vitesse d'exécution. La réaction en chaîne par polymérase est une méthode de diagnostic urgente. Vous pourrez connaître la réponse dès le lendemain.
• La confiance est de 80%. Grâce à la méthode PCR, les particules virales peuvent être détectées, même si leur concentration est faible. Cela vous permet de diagnostiquer la maladie à un stade précoce et de commencer le traitement en temps opportun.
• Diagnostic précoce de l'infection par le VIH. Le moment où le VIH est détecté dans le sang par PCR est de 10 à 14 jours après l’infection suspectée. C'est l'intervalle standard pour diagnostiquer le virus de l'immunodéficience. à ce stade, ils ne sont pas encore détectés ; la méthode ELISA ne fonctionne pas.
• Il n'y a pas de restrictions d'âge. Ce test peut être effectué sur un enfant dès sa naissance.

Inconvénients de la méthode PCR pour diagnostiquer le VIH :

• Coût plus élevé par rapport au test immunoenzymatique de 3ème génération.
• Nécessite un équipement médical sophistiqué.
• L'erreur est de 20 % en raison de la grande sensibilité de la réaction. En cas de maladies auto-immunes, de tumeurs malignes, d'infections chroniques, la PCR peut donner un résultat faussement positif.

Qui a besoin du PCR ?

• Une réponse précoce est nécessaire pour un diagnostic préliminaire. La PCR permet de confirmer ou d'infirmer les résultats ELISA.
• L'immunotransfert a donné un résultat positif. Si une analyse PCR est effectuée en premier, la confirmation du résultat par immunoblot est obligatoire. Les recherches se complètent. En utilisant 2 méthodes à la fois, les médecins éliminent la possibilité d'erreurs.
• Une fois le résultat positif confirmé, la PCR permet de surveiller l’efficacité de la thérapie.
• Utilisé pour tester la présence de sang d'un donneur.
• La PCR peut être réalisée même sur des enfants de moins d’un an. Cette méthode est utilisée pour connaître le statut VIH des nouveau-nés dont les mères sont porteuses du virus. Un test effectué dans les premiers jours de la vie permettra de savoir si une infection intra-utérine s'est produite. L'infection peut survenir pendant le passage du bébé dans le canal génital. acquis par le bébé lors de l'accouchement peut être identifié après 2 à 3 semaines.

Combien de temps faut-il pour faire un test PCR et où puis-je l'obtenir ?

Réaliser un test PCR pour le VIH et déchiffrer les résultats ne demande pas beaucoup de temps. La collecte de sang prend 5 à 7 minutes. Dans le cas standard, le technicien de laboratoire n’a besoin que de 24 heures pour préparer le certificat. Le diagnostic ne prend pas plus de 8 heures, le reste du temps est nécessaire à l'inscription. Le patient reçoit le rapport le jour ouvrable suivant. effectuer dans les 2 heures.

Ce type de dépistage du VIH n'est pas effectué dans le cadre de l'assurance maladie obligatoire. Vous ne pouvez pas recevoir ce service gratuitement dans une clinique publique. Mais presque tous les laboratoires commerciaux disposent généralement du matériel et des réactifs nécessaires. Le test PCR est souvent inclus dans le dépistage général du VIH. Le prix des diagnostics complexes varie de 600 à 1 000 roubles.

Vous pouvez terminer la procédure de manière anonyme. A l'accueil, le patient se voit attribuer un numéro individuel grâce auquel il connaîtra le résultat. Les centres médicaux modernes affichent toutes les données sur leur site Web dans le compte personnel du client.

La principale différence entre ces méthodes de diagnostic réside dans le fait que le dépistage du virus VIH (SIDA) est plus précis, plus précoce et nécessaire pour un diagnostic et un traitement complets.

Bien que le test d'anticorps n'ait pas une telle précision, il présente un avantage indéniable : un prix bas et un temps de production court.

• Vénéréologues expérimentés avec plus de 20 ans d'expérience
• Tests urgents pour le VIH, la syphilis, l'hépatite B, l'hépatite C - 500 roubles pour une infection, les tests seront prêts dans 20 minutes
• Le traitement est anonyme - votre passeport n'est pas requis
• Clinique au centre de Moscou, à 5 minutes des stations de métro Novokuznetskaya ou Tretyakovskaya, parking disponible

A la clinique Polyclinique +1, les tests de recherche d'anticorps contre le VIH (SIDA) peuvent être effectués en 20 minutes, le sang est prélevé dans une veine. Le coût d'une telle analyse est de 500 roubles. Vous pouvez passer ce test et d'autres de manière totalement ANONYME.

Les tests de dépistage du virus VIH (SIDA) deviennent positifs au bout de 5 à 7 jours

Les tests de dépistage du virus VIH (SIDA) deviennent positifs 5 à 7 jours après l'infection, augmentant progressivement le pourcentage de détection et atteignant 100 % au bout de 30 à 40 jours.

Il convient de noter que dès les premiers stades d’une éventuelle infection, vous pouvez prendre une prophylaxie contre l’infection par le VIH. Cette prévention a été bien testée chez les femmes enceintes infectées par le VIH qui accouchent. Grâce à cette prévention, 3 enfants sur 4 naissent en bonne santé.

Les tests de dépistage du virus VIH (SIDA) sont réalisés en deux versions :

• Détection du VIH (SIDA) (résultat positif-négatif)
• Détection du VIH (SIDA) avec un test de concentration (si le test est positif, la quantité de virus dans 1 ml de sang est déterminée). Ce test est la référence en matière de diagnostic.

Le délai de dépistage du virus VIH (SIDA) varie de 3 à 10 jours

Les tests d'anticorps (ELISA) contre le VIH (SIDA) dépendent de l'état du corps et commencent à apparaître sous forme de résultats positifs après 2-3 semaines ; la probabilité maximale de détecter une telle analyse peut atteindre jusqu'à 6 mois après l'infection. . Lors de la recherche d'anticorps contre le VIH (SIDA), les réactions sont d'abord effectuées dans un laboratoire ordinaire ; en cas de test positif, le sang est envoyé à un laboratoire spécialisé dans le VIH. Dans ce cas, le patient est informé que son sang est conservé pendant 10 à 15 jours. Seul un laboratoire spécialisé dans le VIH peut émettre une conclusion sur un test positif aux anticorps contre le virus de l'immunodéficience humaine.

A la clinique Polyclinique +1, des tests de recherche d'anticorps anti-VIH peuvent être effectués en 20 minutes, pour lesquels du sang est prélevé dans une veine.

Le coût d'une telle analyse 500 roubles. Vous pouvez réussir ce test et d'autres dans leur intégralité ANONYME.

Nous vous attendons à notre clinique.

L'infection par le VIH est une maladie virale grave avec une longue période asymptomatique, caractérisée par des dommages au système immunitaire humain et dangereuse en raison de son diagnostic tardif. Souvent, les termes « VIH » et « SIDA » sont utilisés comme synonymes, mais en fait, le SIDA est la phase terminale (dernière) de l'infection par le VIH, dont la durée est de 1 à 2 ans. Selon les recherches, entre le moment de l'infection et le moment où la maladie entre dans la phase terminale en l'absence de traitement, 9 à 11 ans s'écoulent en moyenne. Le diagnostic précoce de la maladie par analyse ELISA ou PCR du VIH vous permet de commencer un traitement antirétroviral en temps opportun, d'arrêter la progression de la maladie et de mener une vie bien remplie pendant de nombreuses années, malgré la présence du virus de l'immunodéficience humaine dans le corps.

Voies de transmission du VIH :

• rapports sexuels non protégés;
• transfusion de sang et de produits sanguins;
• utilisation d'instruments non stériles lors d'interventions médicales ;
• blessures du personnel médical avec des instruments non stériles ;
• infection périnatale : transmission du virus pendant la grossesse et l'accouchement.

Des tests de dépistage du SIDA (VIH) sont prescrits :

• lors d'un contact sexuel occasionnel ;
• lors de la planification d'une grossesse et pendant la grossesse ;
• en préparation à l'hospitalisation;
• avec une perte de poids soudaine ;
• avec une augmentation prolongée de la température corporelle d'origine inconnue.

Test sanguin rapide pour le VIH

• détecter le virus pendant la « fenêtre séronégative » ;
• si le résultat de l'immunoblot est douteux ;
• déterminer le génotype du virus - VIH-1 ou VIH-2 ;
• contrôler la charge virale sur le corps ;
• déterminer le statut VIH des nouveau-nés si la mère est infectée par le VIH ;
• après une transfusion sanguine.

Test VIH anonyme

Attirez votre attention sur : les résultats des tests anonymes de dépistage du SIDA (VIH) ne peuvent être utilisés pour des examens professionnels, une hospitalisation ou une mise à disposition chez le médecin traitant dans une clinique.

Les résultats d'un test VIH, quelle que soit leur issue, ne sont délivrés que si le patient contacte personnellement le service de laboratoire. Lors de l'examen de mineurs (moins de 14 ans) - au représentant légal indiqué dans l'ordonnance.

Les résultats sont délivrés sur présentation d’un contrat, d’un devis et d’une pièce d’identité du patient lui-même ou de son représentant précisé dans la commande.

SI UN TEST VIH EST PRESCRIT À DES FINS DE PRÉPARATION À L'HOSPITALISATION OU POUR UNE PROVISION DANS UN ÉTABLISSEMENT DE SANTÉ, L'ENREGISTREMENT DES DEMANDES EST EFFECTUÉ sous réserve de la fourniture obligatoire par le patient des données suivantes :

1) Pour les résidents de Moscou et de la région de Moscou

• Nom et prénom
• Jour, mois et année de naissance
• Information d'inscription
• Passeport
• Police d'assurance (série et numéro de la police d'assurance, nom de la compagnie d'assurance).

• Nom et prénom
• Jour, mois et année de naissance
• Information d'inscription
• Police d'assurance (série et numéro de la police d'assurance, nom de la compagnie d'assurance)
• Photocopie (scan) du passeport

Combien de temps faut-il pour effectuer un test de dépistage du VIH ?

Les résultats du test ELISA peuvent être obtenus dans un délai d'un jour ouvrable, mais au plus tôt 1,5 à 3 mois à compter de la date de l'infection suspectée ; le résultat du diagnostic PCR peut être connu dans les 10 jours à compter de la date de l'infection suspectée. Le délai d’exécution pour un test PCR en temps réel est de 3 jours ouvrés.