HIV, AIDS testleri. HIV PCR testi nasıl yapılır? HIV inf ve PCR testleri

Tanım

Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), 1983 yılında Amerikalı biyokimyacı Carey B. Mullis tarafından icat edildi. Bu keşfi nedeniyle 1993 yılında Nobel Ödülü'ne layık görüldü.

Günümüzde moleküler biyolojinin modern bir yöntemi olan PCR'nin uygulama alanları son derece geniştir. PCR teşhisi tıbbi uygulamada özel bir yere sahiptir. Bunun nedeni ise oldukça basit: Polimeraz zincir reaksiyonu imkansızı mümkün kılıyor.

PCR teşhisi genellikle mecazi olarak samanlıkta iğne bulabileceğiniz ve daha sonra bu iğnelerden bir samanlık oluşturabileceğiniz bir yöntem olarak tanımlanır. "İğne", bir hücrenin genetik materyalinin (DNA veya RNA) küçük bir parçasıdır.

Dolayısıyla bu yöntemin keşfi, moleküler biyoloji alanında son yıllardaki en dikkat çekici olaylardan biridir. PCR yönteminin geliştirilmesi, genel olarak tıbbi teşhisin niteliksel olarak yeni bir seviyeye yükselmesine olanak sağlamıştır.

PCR Temelleri

Yöntemin temeli, görsel tespit için yeterli olacak miktarda genetik materyal elde etmek amacıyla DNA'nın belirli bir bölümünün tekrar tekrar seçici kopyalanması (amplifikasyonu)'dur. Bu durumda, incelenen biyomateryalde mevcut olması koşuluyla, DNA'nın yalnızca belirli bir bölümü birçok kez kopyalanır (çoğaltılır).

Ayrıca araştırma, DNA bölümlerinin kopya sayısını artırmanın yanı sıra, genetik materyalle başka manipülasyonlara da izin veriyor. Bu nedenle, yöntem bilimsel araştırmalarda, biyolojik ve tıbbi uygulamalarda yaygın olarak kullanılmaktadır: bulaşıcı ve kalıtsal hastalıkların teşhisinde, mutasyonların belirlenmesinde, genotiplemede, babalığın belirlenmesinde, kişisel kimlik tespitinde vb.

Bulaşıcı hastalıkların tanısında PCR

Günümüzde enfeksiyonların PCR tanısı en doğru, hassas ve etkili klinik laboratuvar yöntemlerinden biridir. Üstelik tespit edilen patojenlerin aralığı neredeyse sınırsızdır; istenen patojenin PCR analizi için bir test sistemi geliştirilecektir.

PCR, yüksek hassasiyeti nedeniyle, minimum içeriğiyle bile patojeni tanımlamanıza olanak tanır (yani, incelenen biyomateryalde DNA'sının yalnızca birkaç molekülü mevcuttur).

PCR, diğer yöntemlerle (immünolojik, kültürel, mikroskobik) yapılamadığında bulaşıcı hastalıkların patojenlerini tespit eder. Bu nedenle, bir dizi bulaşıcı ajan için polimeraz zincir reaksiyonu yöntemi "altın standart" haline geldi; zamanla test edildi ve klinik olarak test edildi. Bulaşıcı hastalıkların modern laboratuvar teşhislerinde PCR, patojenlerin doğrudan tespiti için en hassas ve spesifik yöntemdir. Bu sadece hastalığın etiyolojisini belirlemekle kalmaz, aynı zamanda bulaşıcı sürecin seyrini izlemeye ve tedavinin etkinliğini değerlendirmeye de olanak tanır.

PCR yöntemi kullanılarak CYBE testi özellikle koşulsuz patojenik mikroorganizmaların neden olduğu bulaşıcı sürecin asemptomatik seyri ile ilgilidir (Klamidya, kalitatif DNA tayini; Mikoplazma, kalitatif DNA tayini; Gonore ajanı, kalitatif DNA tayini; Trichomonosis ajanı, kalitatif DNA tayini) . Örneğin, kadınlarda kronik bel soğukluğu durumunda, bakteriyolojik yöntem kullanılsa bile, serviks veya üretradaki kronik inflamatuar sürecin mevcut semptomlarına rağmen gonokokları tanımlamak çoğu zaman mümkün değildir.

Modern PCR teşhisi, yalnızca bulaşıcı ajanların genetik materyalini tanımlamaya değil, aynı zamanda DNA/RNA konsantrasyonlarını da belirlemeye (kantitatif araştırma formatı) olanak tanır. Tedaviye karar vermede patojen sayısının belirlenmesi, özellikle fırsatçı mikroorganizmaların tanımlanması durumunda önemlidir (Mikoplazma, DNA'nın kantitatif tespiti; Ureaplasma tiplemesi, DNA'nın kantitatif tespiti).

PCR yönteminin geliştirilmesindeki ana yönlerden biri, CMD'de geliştirilen ve bir test tüpünde (ve bir reaksiyonda) birkaç patojenin tespit edilmesini mümkün kılan "Multiprime" formatıdır.

• İksodid keneler tarafından bulaşan enfeksiyonların patojenleri

Hepatitin PCR tanısı

Şu anda karaciğer hasarına neden olma yeteneği kanıtlanmış en az 5 virüs bilinmektedir. Bunlar hepatit A, B, C, D, E'nin etken maddeleridir. Nadir durumlarda hepatite Epstein-Barr ve herpes simpleks virüsleri neden olabilir. TT ve hepatit G virüsleri gibi ajanların karaciğeri enfekte etme yeteneği günümüzde herkes tarafından tanınmamaktadır. Tüm bu virüsler farklı ailelere aittir, farklı biyolojik özelliklere sahiptir ve buna bağlı olarak tedavi taktikleri de hepatitin etiyolojisine bağlı olarak önemli ölçüde farklılık gösterecektir.

Yukarıdakiler dikkate alındığında, çok acil bir sorun, viral hepatitin belirli bir patojenin tanımlanmasıyla yeterli etiyolojik tanısıdır. Modern moleküler biyolojik yöntemler kullanılmadan bu mümkün değildir. Bu nedenle hepatitin polimeraz zincir reaksiyonu yöntemi kullanılarak teşhis edilmesi, hastalığın nedeninin belirlenmesinde ve ileri tedavi taktiklerinin belirlenmesinde en önemli adımlardan biridir.

HIV enfeksiyonunun tanısında PCR

Şu anda, HIV enfeksiyonunun laboratuvar tanısı için en erişilebilir ve aynı zamanda hassas yaklaşım kullanılmaktadır - enzim bağlantılı immünosorbent tahlili (ELISA) kullanılarak kandaki HIV antikorlarının tespiti - ardından pozitif sonuçların doğrulanması immünoblotlama (IB) kullanılarak analiz. Bu yaklaşımı kullanarak HIV ile enfekte kişilerin tespit edilmesinin verimliliği %99 veya daha fazlasına ulaşabilmektedir.

Ancak HIV enfeksiyonunun serolojik tanısının bir takım sınırlamaları vardır:

1. Sözde dönem boyunca verimsizlik “serolojik pencere” (enfeksiyondan sonraki ilk haftalarda antikorların yokluğu veya düşük konsantrasyonu nedeniyle tespit edilmez).
2. HIV ile enfekte annelerden doğan tüm çocuklarda HIV'e karşı antikorlar uzun süredir tespit edilmiştir.
3. Yanlış pozitif ELISA sonuçları, kanda HIV antijenlerine benzer antijenlere karşı antikorların varlığına bağlıdır.
4. ELISA ve immünoblotlamanın yanlış negatif ve şüpheli sonuçları (özellikle hastalığın terminal aşamasındaki hastalarda).

Bu nedenle HIV enfeksiyonu taramasına yönelik PCR testleri artık giderek daha fazla kullanılmaktadır. “HIV enfeksiyonu testi için metodolojik önerilere” göre (Rusya Federasyonu Sağlık ve Sosyal Kalkınma Bakanlığı tarafından 08/06/2007 tarihinde onaylanmıştır) “hastalar için yakın zamanda HIV enfeksiyonu riskini gösteren epidemiyolojik kriterler varsa ve ELISA ve IB'de aynı anda muhtemelen yanlış pozitif veya yanlış negatif sonuçlar; örneğin, HIV ile enfekte annelerden doğan çocukları veya "seronegatif pencere" dönemindeki hastaları incelerken, HIV'i tespit eden PCR yöntemi kullanılır. gen materyali...” Zaten belirlenmiş bir HIV enfeksiyonu tanısı durumunda, PCR analizi prognoz, dinamik gözlem ve tedavinin izlenmesi için kullanılır.

• İnsan immün yetmezlik virüsü, provirüs DNA'sının kalitatif tespiti, PCR
• İnsan immün yetmezlik virüsü RNA, PCR'nin kantitatif tayini
• Kapsamlı teşhis: Hepatit C virüsü RNA/hepatit B virüsü DNA/insan immün yetmezlik virüsü (HIV) RNA tip 1 ve 2'nin kalitatif tespiti

Moleküler Teşhis Merkezi'nde (CMD) kimliğinizi belirtmeden HIV için PCR testi yaptırabilirsiniz.

PCR (polimeraz zincir reaksiyonu), yalnızca çok küçük miktarlarda DNA veya RNA içeren örneklerde bile herhangi bir kısa DNA (veya RNA) dizisini analiz etmenize ve böylece patojenik bir patojenin varlığını/yokluğunu belirlemenize olanak tanıyan bir moleküler genetik yöntemidir ( örneğin insan HIV veya hepatit B virüsü veya Mycobacterium tuberculosis olup olmadığını belirlemek). PCR, analiz için seçilen DNA veya RNA bölümlerini çoğaltmak/çoğaltmak/klonlamak (çoğaltmak) için kullanılır.

PCR yöntemi o kadar basittir ki bir okul çocuğu bile bunu yapabilir)

Daha önce DNA amplifikasyonu, ilgilenilen bölümlerin bakteriyel ekspresyon vektörlerine klonlanmasını içeriyordu ve haftalar sürüyordu. Ancak artık PCR test tüplerinde yapıldığına göre, sadece birkaç saat sürer. PCR yüksek verimli Böylece DNA'dan çok sayıda kopya oluşturulabilir.

DNA dizisi ve nükleotid yazışmaları.

Vericinin eli asla başarısız olmasın

"AIDS.HIV.STD." Projesi gönüllü HIV/AIDS uzmanları tarafından, masrafları kendilerine ait olmak üzere, insanlara gerçeği ulaştırmak ve mesleki vicdanlarının önünde açık olmak amacıyla oluşturulmuş, kar amacı gütmeyen bir kuruluştur. Projeye yapılacak her türlü yardıma minnettar olacağız. Sana bin kat sevap olsun: BAĞIŞ YAPMAK .

Üstelik PCR, doğanın DNA'yı kopyalamak için kullandığı moleküllerin aynısını kullanır:

• Kopyalanacak DNA uzantısının başlangıcına ve sonuna uyacak şekilde sentezlenen iki "primer", kısa tek sarmallı DNA dizisi.
• DNA'nın bir bölümü boyunca hareket eden, kodunu okuyan ve bir kopyasını oluşturan, polimeraz adı verilen bir enzim.
• Bu polimerazın yapması gereken bir grup DNA bloğu.

Yani PCR, DNA parçacıklarının (bazen RNA) belirli bir çözelti içinde veya biriktirilebilecekleri özel bir yüzey üzerinde çoğaltıldığı bir tekniktir.

PCR, bilim adamlarının samanlıkta iğne bulmasına ve daha sonra bu iğnelerden samanlık oluşturmasına olanak tanıyan bir tekniktir.

Bir yöntem olarak PCR'nin görevi, çoğaltmak (çoğaltmak), mümkün olduğu kadar çok kopyasını çıkarmak, böylece bunların kime ait olabileceğini (belirli bir kişiye, hayvana veya patojenik organizmaya) belirlemek mümkün olmaktır. DNA/RNA varlığının izleri.

Ancak PCR amplifikasyonu tanısal testin yalnızca bir parçasıdır. Amplifikasyondan sonra güçlendirilmiş segmentler diğer nükleotid segmentleriyle karşılaştırılması gerekiyor, ama tanınmış bir kaynaktan(örneğin belirli bir kişi, hayvan veya patojenik organizma). Benzersiz segmentlerin bu karşılaştırması genellikle PCR ile üretilen nükleotid dizilerinin insanlardan, patojenlerden veya diğer kaynaklardan gelen bilinen nükleotid dizilerinin yanına özel bir jel içerisine yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir.

Jelden bir elektrik akımı geçtiğinde, farklı nükleotid dizileri, elektrik yüklerine ve moleküler boyutlarına göre "merdiveni" andıran bantlar oluşturur. Buna jel elektroforezi denir. Nükleotid dizilerinin kimliğini gösterecek şekilde jelde aynı seviyelere göç ederler. Bu yöntem en popüler geç dönem PCR testlerinden biridir.

PCR nasıl çalışır?

1983 yılında Kari Mullis, DNA dizilerini çoğaltmak için temel adımları geliştirdi. O ve Michael Smith, 1993 yılında PCR'nin geliştirilmesi nedeniyle Nobel Ödülü'ne layık görüldü.

PCR, tek bir test tüpünde uygun kimyasallarla ve belirli bir ısıtma sıcaklığında gerçekleştirilir.

Aşağıdaki reaktifler veya kimyasallar gereklidir:

• Bir nükleotid dizisi içeren bir örnek (kan, saç, irin, deri vb.'den).
• DNA Primerleri: Tamamlayıcı bir nükleotid dizisinin sentezini teşvik eden nükleotid dizilerine bağlanan kısa tek sarmallı DNA.
• DNA polimeraz: DNA bir primere bağlandığında, tamamlayıcı baz çiftleri oluşturmak için DNA yapı bloklarını ekleyerek DNA fragmanı boyunca aşağıya doğru hareket eden ve böylece DNA'nın tamamlayıcı nükleotid zincirini sentezleyen bir enzim (ısıya dayanıklı DNA polimerazın tanıtımı, Taq polimeraz, türetilmiştir) ısıya dayanıklı bakterilerden arındırılmış olup, PCR yeteneğini önemli ölçüde artırır).
• Çözeltide nükleotidler (adenin, timidin, sitozin ve guanin, sırasıyla A, T, C ve G olarak kısaltılır) adı verilen DNA yapı taşlarının büyük bir fazlası. Bu bloklar bir araya getirildiğinde bir nükleotid dizisi veya tek bir DNA zinciri oluştururlar. Bu yapı taşları tamamlayıcı yapı bloklarını zayıf hidrojen bağlarıyla bağladığında (örneğin, A yalnızca T'ye bağlanacak ve G yalnızca C'ye bağlanacaktır), orijinal tek sarmallı DNA'ya bağlanan tamamlayıcı bir DNA nükleotid dizisi oluşur. Bağlanma tamamlandığında, tamamlayıcı çift sarmallı DNA spesifik bir dizide oluşur.

Kari Mullis çok ilginç, havalı bir adam, bakın PCR'yi nasıl bulduğu hakkında ne kadar ilginç konuşuyor:

Astrolojiye inanıyor ama HIV'in AIDS'e neden olduğuna inanmıyor.)

Polimeraz zincir reaksiyonu daha sonra numuneden alınan bir DNA segmentinin yukarıdaki reaktifleri içeren bir tüpe yerleştirilmesiyle başlar. Çözelti 94°C'ye ısıtılır. Isıtma, tamamlayıcı DNA iplikçiklerinin oluşmasına izin veren hidrojen bağlarını kırar, dolayısıyla karışımda yalnızca tek iplikçik bulunur (buna çift iplikli DNA denatürasyonu denir).

Karışımın 54°C'ye soğumasına izin verilir. Bu sıcaklıkta, DNA primerleri ve DNA polimeraz tek sarmallı DNA'ya bağlanır (buna DNA tavlaması denir). Karışımda yapı taşları fazla (yüksek konsantrasyon) olduğundan, polimeraz bunları yeni tamamlayıcı DNA şeritleri (DNA uzantısı adı verilen) oluşturmak için kullanır ve bu işlem 72°C'de daha hızlı gerçekleşir. Bu işlem, orijinal molekülün tek iplikçiklerinin her birinden yeni bir çift iplikli DNA molekülü oluşturur.

Bu döngü, termal döngü cihazı adı verilen, ısıtma-soğutma döngülerini otomatik olarak tekrarlayan bir makinede yaklaşık 40 kez tekrarlanır ve ısıtma-soğutma döngüsü her tamamlandığında her DNA dizisinin miktarı iki katına çıkar. Başlangıçta kısa bir DNA segmenti olan şey, 40 ikiye katlama döngüsünden sonra yaklaşık 100 milyar kopyaya genişletilebilir.

PCR testine ne zaman ihtiyaç duyulur?

PCR testi, doktorların hastaları teşhis etmesine ve tedavi etmesine yardımcı olan birçok farklı tıbbi soruyu yanıtlayabilen bir dizi testin temelini oluşturur. Örneğin PCR testleri Patojenik organizmaları tespit etmek ve tanımlamak hastalarda, özellikle kültürü zor olanlarda (örn. HIV ve diğer virüsler ve bazı mantarlar).

Bazı doktorlar teşhise yardımcı olması için PCR testleri önermektedir. genetik hastalıklar diğer doktorlar gibi biyolojik ilişkileri tespit etmek için PCR kullanıyor çocukların ebeveynlerinin tespiti. PCR testleri aynı zamanda tanımlama ve karakterizasyon için de kullanılır. genetik mutasyonlar ve belirli noktalarda bulunan yeniden düzenlemeler kanser hastalıkları.

Bununla birlikte, PCR testleri değiştirilmiş ve evrimsel biyoloji, genetik parmak izi, adli araştırmalar ve diğerleri dahil olmak üzere bilimsel araştırmanın birçok yönüne dahil edilmiştir.

RT-PCR nedir?

Ters transkriptaz PCR (RT-PCR), RNA miktarını tespit etmek ve ölçmek için tasarlanmış bir PCR testidir. İlk PCR testleri DNA'yı güçlendirmiş olsa da, birçok virüs ve diğer biyolojik bileşenler (mitokondri gibi) genetik materyal olarak RNA'yı kullanır. RT-PCR, önce RNA'nın alınması ve RNA zincirinin bir DNA zincirine dönüştürülmesiyle normal PCR'den farklılık gösterir. Bu, DNA polimeraz yerine ters transkriptaz adı verilen bir enzimin kullanılması dışında, esas olarak yukarıda açıklanan PCR için aynı yöntemle yapılır.

Ters transkriptaz, bir RNA zincirinin tamamlayıcı bir DNA zincirine dönüştürülmesini sağlar. Bu reaksiyon meydana geldiğinde, DNA'nın amplifikasyonu için rutin PCR yöntemi kullanılabilir. RT-PCR birçok RNA virüsünü tespit etmek ve incelemek için kullanılır. RT-PCR, gerçek zamanlı PCR adı verilen başka bir PCR çeşidi ile karıştırılmamalıdır.

Gerçek zamanlı PCR, amplifiye DNA'nın normal 40 prosedür döngüsü içinde analizine olanak tanıyan bir PCR varyasyonudur. Prosedür geleneksel döngüsel PCR'ye benzese de, gerçek zamanlı PCR, bazı yapı bloklarına veya küçük nükleotid şeritlerine bağlanan floresan boyaları kullanır. Kullanılan yönteme bağlı olarak, amplifiye DNA şeritleri oluştuğunda floresans meydana gelir. Floresans miktarı 40 döngü boyunca ölçülebilir ve araştırmacıların amplifikasyon döngüleri sırasında belirli ürünleri ve bunların miktarlarını ölçmesine olanak tanır.

Bu genellikle araştırmacıların veya teknisyenlerin PCR ürünlerini analiz etmek için gereken jel elektroforezini veya diğer ikincil prosedürleri atlamalarına ve böylece daha hızlı sonuçlar elde etmelerine olanak tanır. Gerçek zamanlı PCR ve RT-PCR, orijinal PCR testinin varyasyonları veya modifikasyonlarıdır. Ancak, belirli sorunları çözmek için kullanılan ve kullanılan çok daha fazla seçenek (en az 25) vardır. Hepsinin montaj PCR, sıcak başlangıç ​​PCR, multipleks PCR, katı hal PCR ve daha birçok farklı adı vardır.

HIV için PCR testi nedir?

PCR(polimeraz zincir reaksiyonu) - bir virüsün genetik materyalini çoğaltma yöntemi, virüsün genetik materyalini belirleyen bir test- HIV RNA'sı veya DNA'sı.

Virüs minimum miktarda bulunuyorsa reaksiyon sonucunda bu miktar kat kat artar. Bu nedenle PCR'nin tanısal değeri yüksektir.

Tipik olarak bu test belirlemek için kullanılır. Bağışlanan kanda HIV veya HIV'in erken tespiti için HIV'e karşı spesifik antikorlar üretilmeden önce vücutta. Spesifik antikorlar, geleneksel HIV testleri (ELISA) ile tespit edilir, ancak enfeksiyondan yalnızca 1-3, nadiren 12 ay sonra tespit edilir. A PCR kullanarak 14 gün sonra oldukça doğru bir cevap verebilirsiniz.%98 güvenle ve 5 gün sonra bile güven %80 olacaktır. HIV PCR, ELISA'dan daha pahalı ve daha emek yoğun bir testtir, dolayısıyla Herkes kullanmıyor ancak yalnızca özel endikasyonlar için (HIV enfeksiyonlu bir kişiyle tıbbi kaza geçiren bağışçılar) veya bir ücret karşılığında.

HIV için kalitatif PCR testi— HIV-1/HIV-2 virüsünün mevcut olup olmadığını belirler ancak virüsün kopya sayısını belirlemez (sayıyı belirlemek için kantitatif PCR kullanılır). Bilinen HIV enfeksiyonu tanısı olanlara yüksek kaliteli PCR YAPILMAZ. Onun Bunu yalnızca HIV enfeksiyonu olup olmadığını henüz bilmeyenlere yapıyorlar.

Bu, HIV'den etkilenen bir lenfosit hücresinin genomundaki tamamlayıcı DNA bölgesinin belirlenmesine yönelik bir yöntemdir. Onlar. Belirlenen virüsün kendisi değil, virüsün hücreye entegre ettiği materyaldir. DNA'sı zaten hücrenin çekirdeğinde depolanacak ve daha sonra buradan okunacak ve çoğalacaktır (kendisini kopyalayacaktır).

HIV için kantitatif PCR testi

HIV RNA için kantitatif PCR analizi— RNA virüsünün kandaki kopya sayısını belirler (DNA PCR, örneğin çocuklarda hücrelerdeki virüsü belirlemek için kullanılır). Yalnızca HIV ile enfekte kişiler üzerinde yapılır Tedaviyi izlemek, hastalık sürecinin ciddiyetini ve tedavinin etkinliğini belirlemek.

PCR yöntemi kullanılarak enfeksiyondan ne kadar süre sonra HIV tespit edilebilir?

HIV pozitif partnerle temastan kaç gün sonra HIV PCR testi yaptırabilirim?

HIV, enfeksiyondan 4-14 gün sonra PCR kullanılarak tespit edilebilir. Riskli temastan 14 gün sonra HIV için negatif PCR sonucu güvenilirdir, ancak mevcut düzenlemelere göre testin hala yardımıyla yapılması gerekmektedir.

DNA PCR'nin HIV RNA PCR'den farkı nedir?

RNA Tipik olarak teşhis konulan bireylerdeki viral yükü değerlendirmek için kantitatif testlerde kullanılır, örneğin tedavinin etkinliğini değerlendirmek için.

DNA- mononükleer hücrelerde, örneğin, HIV'e karşı anneden gelen antikorların ELISA yönteminin kullanılmasını engellediği çocuklarda teşhis için.

Her iki test de hem niceliksel hem de niteliksel olabilir.

Her ikisi de özel durumlarda teşhis için kullanılabilir, ancak sistemin teknik parametrelerinin getirdiği belirli sınırlamalar dikkate alınarak kullanılabilir; bir doktorun önerdiği şekilde.

HIV PCR yanlış pozitif olabilir mi, nedenleri?

Doğru yapılırsa: hemşire tüpleri karıştırmadı, kan almadan önce pasaporta baktı, tüpü doğru etiketledi, talimatları doğru yazdı vb. ve laboratuvar uzmanı (genellikle bir laboratuvar asistanı) her şeyi talimatlara göre yaptı, o laboratuvar düzenlemelerinin tüm gerekliliklerini karşıladı (örneğin, biyomateryal çapraz kontaminasyon (kontaminasyon) olmadan doğru bir şekilde "kazıldı") ve yüksek kaliteli bir test sistemi kullanıldı, SONRA PCR yalnızca 2'de yanlış pozitif OLABİLİR Vakaların yüzdesi (bu, kullanılan test sistemlerinin hassasiyetinden kaynaklanmaktadır) .

Ancak tıbbi personel tarafından hatalar yapılmışsa kurumlar , SONRA PCR vakaların %2'sinden fazlasında yanlış pozitif olabilir.

HIV için PCR testi nasıl yapılır?

PCR yöntemini kullanarak HIV testi yapmak için, tercihen (ancak mutlaka değil) sabahları aç karnına bir damardan kan bağışlanır.

HIV PCR için nerede test yaptırabilirim?

Bunu yapmak için " girin HIV PCR testi yaptırın" ve talebe bulunduğunuz yeri ekleyin ve bölgenizde PCR araştırması yapan kuruluşları göreceksiniz.

Örneğin,

PCR HIV testinin maliyeti ne kadardır?

Yakın 1,5-3 bin ruble. bölgeye bağlı olarak.

HIV için PCR testi sonuçlarının güvenilirliği nedir?

Başından sonuna kadar 14 gün enfeksiyondan sonra HIV için PCR'nin güvenilirliği 4-5 gün arasında% 100'dür - güvenilirlik% 80'dir.

HIV için PCR testi yapmak ne kadar sürer?

Teknik olarak 4-6 saat ancak gerçekte bu laboratuvarın organizasyonuna bağlıdır ve genellikle sonuç 2-3 gün içinde verilir.

Yeni doğmuş bir bebekte HIV için PCR

HIV pozitif bir anneden doğan 1,5 yaş altı çocuğun HIV'e karşı antikorları bulunduğu için ELISA ile çocuğun HIV ile enfekte olup olmadığını belirlemek mümkün değildir. Bu durumda PCR kullanılır:

• 1 aylık bir çocukta PCR kullanılarak virüs tespit edilirse, bu onun enfekte olduğu anlamına gelir.
• Bir çocuğun 1-2 aylık ve 4-6 aylıkken PCR'si negatifse, annenin onu anne sütüyle beslememesi koşuluyla çocuk sağlıklıdır.

PCR ve ELISA arasındaki fark nedir?

PCR virüsün kendisini belirler ve ELISA, vücudun virüse karşı tepkisini (antikor şeklinde) belirler.

PCR, virüsün varlığını ELISA'dan daha hızlı tespit eder.

İnsan bağışıklık yetersizliği virüsünün neden olduğu hastalığın tedavisine yönelik bir yöntem henüz bulunamadı. Ancak teşhis ciddi bir başarı elde etti. PCR yöntemi kullanılarak yapılan HIV testi, virüsün vücutta tespit edilmesine yönelik seçeneklerden biridir.

Polimeraz zincir reaksiyonu veya PCR, HIV tanısı için modern yöntemlerden biridir. Nükleik asitlerin kendilerini yeniden üretme yeteneğine dayanır. Herhangi bir canlı organizmanın hücresi protein ve nükleik asitleri içerir:

• RNA - ribonükleik asit,
• DNA - deoksiribonükleik asit.

Bu makromoleküller genetik kodu saklar. Kandaki viral hücrelerin konsantrasyonu düşükse, numune tüm DNA zincirlerini değil, bunların bireysel "yapı taşlarını" - nükleotidleri içerir. Polimeraz zincir reaksiyonu viral hücrelerin bu tür "parçalarını" bile tespit eder. Bu, olası bir enfeksiyondan sonra, ilk klinik semptomların henüz ortaya çıkmadığı erken dönemde sonuç almanızı sağlar.

En doğru sonuç, analiz için venöz kan kullanılarak elde edilebilir. Sınava girmeden birkaç gün önce. İmmün sistemi uyarıcı ilaçları almayı 2 hafta önce bırakın.

Bir biyomateryal örneği tıbbi bir laboratuvar reaktöründe sindirilir. Fraksiyonlar daha sonra enzimlerle işlenir. Reaktifler viral molekülün DNA'sı ile birleşir ve onu kopyalar. Bir hücreden 2, 2'den 4'e ve ardından 8'e ulaşırsınız. Sayı katlanarak artar. Zincirleme reaksiyon, viral bileşenin miktarını hızlı bir şekilde artırmanıza ve onu laboratuvar teknisyenleri tarafından görünür hale getirmenize olanak tanır.

Norm, şuna benzeyen negatif bir test sonucudur: "Virüs DNA'sı tespit edilmedi." Bu referans (istatistiksel ortalama) değerdir.

HIV için PCR tekniğinin avantajları ve dezavantajları

PCR kullanarak HIV tanısı koymanın yadsınamaz avantajları vardır, ancak aynı zamanda önemli dezavantajları da vardır. İlki şunları içerir:

• Yüksek doğruluk. Yanlış negatif sonuç alma olasılığı son derece düşüktür.
• Çok yönlülük. Sadece kan değil, diğer biyolojik sıvılar da (vajinal akıntı, meni) araştırma için uygundur. Tükürük ve idrar da kullanılır ancak sonucun doğruluğu daha düşük olacaktır. Bu ortamlarda viral hücrelerin konsantrasyonu önemsizdir.
• Geniş analiz yelpazesi. Bir biyomateryal örneği çeşitli hastalıklar için test edilebilir.
• Yürütme hızı. Polimeraz zincir reaksiyonu acil bir teşhis yöntemidir. Cevabı ertesi gün öğrenebilirsiniz.
• Güven %80'dir. PCR yöntemi kullanılarak viral partiküller konsantrasyonları düşük olsa bile tespit edilebilmektedir. Bu, hastalığı erken aşamalarda teşhis etmenize ve tedaviye zamanında başlamanıza olanak tanır.
• HIV enfeksiyonunun erken tanısı. PCR kullanılarak kanda HIV'in tespit edildiği süre, şüpheli enfeksiyondan sonraki 10-14 gündür. Bu, bağışıklık yetersizliği virüsünün teşhisi için standart aralıktır. bu aşamada henüz tespit edilmemiştir; ELISA yöntemi çalışmıyor.
• Yaş sınırlaması yoktur. Bu test, çocuğa doğduğu andan itibaren yapılabilir.

HIV tanısında PCR yönteminin dezavantajları:

• 3. nesil enzim immunoassay ile karşılaştırıldığında daha yüksek maliyet.
• Gelişmiş tıbbi ekipman gerektirir.
• Reaksiyonun yüksek hassasiyetinden dolayı hata %20'dir. Otoimmün hastalıklarda, kötü huylu tümörlerde ve kronik enfeksiyonlarda PCR yanlış pozitif sonuç verebilir.

Kimin PCR'ye ihtiyacı var?

• Ön tanı için erken müdahale gereklidir. PCR, ELISA sonuçlarının doğrulanmasına veya çürütülmesine yardımcı olur.
• İmmünoblotlama olumlu sonuç verdi. Önce PCR analizi yapılırsa, sonucun immünoblotlama ile doğrulanması zorunludur. Araştırma birbirini tamamlıyor. Doktorlar 2 yöntemi aynı anda kullanarak hata olasılığını ortadan kaldırır.
• Pozitiflik doğrulandıktan sonra PCR, tedavinin etkinliğinin izlenmesine yardımcı olur.
• Donör kanının varlığını test etmek için kullanılır.
• Bir yaşın altındaki çocuklara bile PCR yapılabilir. Bu yöntem, annesi virüs taşıyıcısı olan yenidoğanların HIV durumunu öğrenmek için kullanılıyor. Yaşamın ilk günlerinde yapılan bir test, intrauterin enfeksiyonun oluşup oluşmadığını gösterecektir. Bebek doğum kanalından geçerken enfeksiyon meydana gelebilir. Bebeğin doğum sırasında edindiği bilgiler 2-3 hafta sonra belirlenebilir.

PCR testi yaptırmak ne kadar sürer ve nereden alabilirim?

HIV için PCR testi yapmak ve sonuçları deşifre etmek çok fazla zaman gerektirmez. Kan alımı 5-7 dakika sürer. Standart durumda laboratuvar teknisyeninin sertifikayı hazırlamak için yalnızca 24 saate ihtiyacı vardır. Teşhis 8 saatten fazla sürmez, geri kalan süre kayıt için gereklidir. Hasta raporu ertesi iş günü alır. 2 saat içinde gerçekleştirin.

Zorunlu sağlık sigortası poliçesi kapsamında bu şekilde HIV testi yapılmamaktadır. Bu hizmeti bir devlet kliniğinde ücretsiz olarak alamazsınız. Ancak neredeyse tüm ticari laboratuvarlar genellikle gerekli ekipman ve reaktiflere sahiptir. PCR testi genellikle genel HIV taramasına dahil edilir. Karmaşık teşhislerin fiyatı 600 ila 1000 ruble arasında değişiyor.

İşlemi anonim olarak tamamlayabilirsiniz. Resepsiyonda hastaya sonucu öğreneceği bireysel bir numara verilir. Modern tıp merkezleri, web sitelerindeki tüm verileri müşterinin kişisel hesabında görüntüler.

Bu teşhis yöntemleri arasındaki temel fark, HIV (AIDS) virüsü testinin daha doğru, daha erken yapılması ve tam teşhis ve tedavi için gerekli olmasıdır.

Antikor testinin böyle bir doğruluğu olmasa da yadsınamaz bir avantajı var: düşük fiyat ve kısa üretim süresi.

• 20 yıldan fazla deneyime sahip deneyimli zührevi uzmanlar
• HIV, Frengi, Hepatit B, Hepatit C için acil testler - 500 ruble bir enfeksiyon için testler hazır olacak 20 dakika
• Tedavi anonimdir; pasaportunuza gerek yoktur
• Moskova'nın merkezinde klinik, Novokuznetskaya veya Tretyakovskaya metro istasyonlarına 5 dakika uzaklıkta, otopark mevcut

Poliklinik +1 kliniğinde HIV (AIDS) antikor testleri 20 dakikada yapılabiliyor, damardan kan bağışı yapılıyor. Böyle bir analizin maliyeti 500 ruble, bu ve diğer testleri tamamen ANONİM OLARAK alabilirsiniz.

HIV (AIDS) virüsü testleri 5-7 gün sonra pozitif çıkıyor

HIV virüsü (AIDS) testleri enfeksiyon anından itibaren 5-7 gün sonra pozitif hale gelir, tespit yüzdesi giderek artar ve 30-40 gün içinde %100'e ulaşır.

Olası enfeksiyonun erken evrelerinde HIV enfeksiyonuna karşı profilaksi alabileceğinizi unutmamak gerekir. Bu önleme, doğum yapan HIV ile enfekte hamile kadınlarda iyi bir şekilde test edilmiştir. Bu önleme sonucunda 4 çocuktan 3'ü sağlıklı doğuyor.

HIV (AIDS) virüsüne yönelik testler iki versiyonda gerçekleştirilir:

• HIV (AIDS) Tespiti (sonuç pozitif-negatif)
• Konsantrasyon testi ile HIV (AIDS) tespiti (test pozitif ise 1 ml kandaki virüs miktarı belirlenir). Bu test tanı için altın standarttır.

HIV (AIDS) virüsü testinin teslim süresi 3 ila 10 gün arasında değişmektedir.

HIV'e (AIDS) karşı antikor testleri (ELISA) vücudun durumuna bağlıdır ve 2-3 hafta sonra pozitif sonuçlar şeklinde görünmeye başlar; böyle bir analizin maksimum tespit olasılığı enfeksiyondan sonra 6 aya kadar ulaşabilir . HIV'e (AIDS) karşı antikor ararken, reaksiyonlar başlangıçta normal bir laboratuvarda gerçekleştirilir; pozitif test durumunda kan, özel bir HIV laboratuvarına gönderilir. Bu durumda hastaya kanının 10-15 gün süreyle tutulacağı bildirilir. Yalnızca uzman bir HIV laboratuvarı, insan bağışıklık yetersizliği virüsüne karşı antikorlar için pozitif bir test sonucuna varabilir.

Poliklinik +1 kliniğinde damardan kan alınarak HIV antikor testleri 20 dakikada gerçekleştirilebiliyor.

Böyle bir analizin maliyeti 500 ruble. Bu ve diğer testleri tam olarak geçebilirsiniz ANONİM OLARAK.

Kliniğimize sizleri bekliyoruz.

HIV enfeksiyonu, uzun asemptomatik dönemli, insan bağışıklık sistemine zarar veren ve geç tanısı nedeniyle tehlikeli olan ciddi bir viral hastalıktır. Çoğu zaman “HIV” ve “AIDS” terimleri eşanlamlı olarak kullanılır, ancak aslında AIDS, süresi 1-2 yıl olan HIV enfeksiyonunun terminal (son) aşamasıdır. Araştırmalara göre enfeksiyon anından, tedavi olmadığında hastalığın terminal aşamaya girmesine kadar ortalama 9-11 yıl geçiyor. HIV için ELISA veya PCR analizi kullanılarak hastalığın erken teşhisi, antiretroviral tedaviye zamanında başlamanıza, hastalığın ilerlemesini durdurmanıza ve vücutta insan immün yetmezlik virüsünün varlığına rağmen uzun yıllar dolu bir yaşam sürmenize olanak tanır.

HIV bulaşma yolları:

• korunmasız cinsel ilişki;
• kan ve kan ürünlerinin transfüzyonu;
• tıbbi müdahaleler sırasında steril olmayan aletlerin kullanılması;
• steril olmayan aletlerle tıbbi personelin yaralanması;
• Perinatal enfeksiyon: Virüsün hamilelik ve doğum sırasında bulaşması.

AIDS (HIV) testleri reçete edilir:

• gündelik cinsel ilişki sırasında;
• hamileliği planlarken ve hamilelik sırasında;
• hastaneye yatmaya hazırlık aşamasında;
• ani kilo kaybıyla;
• bilinmeyen kaynaklı vücut ısısında uzun süreli bir artış ile.

HIV için hızlı kan testi

• virüsün “seronegatif pencere” sırasında tespit edilmesi;
• immünoblot sonucu şüpheli ise;
• virüsün genotipini belirlemek için - HIV-1 veya HIV-2;
• vücuttaki viral yükü kontrol etmek;
• annenin HIV ile enfekte olması durumunda yenidoğanın HIV durumunu belirlemek;
• kan naklinden sonra.

İsimsiz HIV testi

Dikkatini şuna çekmek: AIDS (HIV) için anonim testlerin sonuçları, profesyonel muayeneler, hastaneye yatırma veya klinikte ilgilenen hekime hizmet sağlamak için kullanılamaz.

HIV testinin sonuçları, sonuçları ne olursa olsun, yalnızca hastanın laboratuvar departmanıyla kişisel olarak iletişime geçmesi durumunda verilir. Reşit olmayan çocukları muayene ederken (14 yaş altı) - siparişte belirtilen yasal temsilciye.

Sonuçlar, hastanın kendisinin veya siparişte belirtilen hasta temsilcisinin sözleşme, tahmin ve kimlik belgesinin ibraz edilmesiyle verilir.

HASTANEYE HAZIRLIK VEYA BİR SAĞLIK KURULUŞUNDA SUNULMAK AMACIYLA HIV TESTİ ÖNERİLMİŞSE, BAŞVURULARIN KAYITLARI, hasta tarafından aşağıdaki verilerin zorunlu olarak sağlanması koşuluyla gerçekleştirilir:

1) Moskova ve Moskova bölgesi sakinleri için

• Ad Soyad
• Doğum günü, ayı ve yılı
• kayıt Bilgileri
• Pasaport
• Sigorta poliçesi (sigorta poliçesinin seri ve numarası, sigorta şirketinin adı).

• Ad Soyad
• Doğum günü, ayı ve yılı
• kayıt Bilgileri
• Sigorta poliçesi (sigorta poliçesinin seri ve numarası, sigorta şirketinin adı)
• Pasaport fotokopisi (tarama)

HIV testi ne kadar sürer?

ELISA testinin sonuçları 1 iş günü içinde elde edilebilir, ancak enfeksiyon şüphesi tarihinden itibaren 1,5-3 aydan daha erken olamaz; PCR teşhisinin sonucu, enfeksiyon şüphesi tarihinden itibaren 10 gün içinde öğrenilebilir. Gerçek Zamanlı PCR testinin geri dönüş süresi 3 iş günüdür.