Testi za HIV, AIDS. Kako se testirati na HIV PCR? HIV inf in PCR testi

Opis

Polimerazno verižno reakcijo (PCR) je leta 1983 izumil ameriški biokemik Carey B. Mullis. Leta 1993 je za to odkritje prejel Nobelovo nagrado.

Danes so področja uporabe PCR kot sodobne metode molekularne biologije izjemno široka. PCR diagnostika zavzema posebno mesto v medicinski praksi. In razlog za to je povsem preprost: verižna reakcija s polimerazo naredi nemogoče mogoče.

PCR diagnostiko pogosto slikovito opisujemo kot metodo, s katero lahko poiščete iglo v kupu sena in nato iz teh igel zgradite kup sena. "Igla" je majhen delček genetskega materiala celice (DNK ali RNK).

Tako je odkritje te metode eden najimenitnejših dogodkov na področju molekularne biologije v zadnjih desetletjih. Razvoj metode PCR je omogočil dvig medicinske diagnostike nasploh na kakovostno novo raven.

Osnove PCR

Osnova metode je ponavljajoče se selektivno kopiranje (pomnoževanje) določenega odseka DNK z namenom pridobitve takšne količine genetskega materiala, ki bo zadostovala za vizualno detekcijo. V tem primeru se samo določen del DNK večkrat kopira (pomnoži), pod pogojem, da je prisoten v proučevanem biomaterialu.

Poleg tega pa raziskava poleg zgolj povečanja števila kopij odsekov DNK omogoča še druge manipulacije z genskim materialom. Zato se metoda široko uporablja v znanstvenih raziskavah, biološki in medicinski praksi: pri diagnostiki nalezljivih in dednih bolezni, pri ugotavljanju mutacij, genotipizaciji, ugotavljanju očetovstva, osebni identifikaciji itd.

PCR pri diagnozi nalezljivih bolezni

Danes je PCR diagnostika okužb ena najbolj natančnih, občutljivih in učinkovitih klinično laboratorijskih metod. Poleg tega je nabor odkritih patogenov praktično neomejen - razvili bi testni sistem za PCR analizo želenega povzročitelja.

Zaradi visoke občutljivosti vam PCR omogoča identifikacijo patogena tudi z njegovo minimalno vsebnostjo (to pomeni, da je v biomaterialu, ki se proučuje, prisotnih le nekaj molekul njegove DNK).

PCR odkrije povzročitelje nalezljivih bolezni, kadar tega ni mogoče storiti z drugimi metodami (imunološke, kulturne, mikroskopske). Zato je za številne povzročitelje okužb metoda verižne reakcije s polimerazo postala "zlati standard", je časovno in klinično preizkušena. V sodobni laboratorijski diagnostiki nalezljivih bolezni je PCR najbolj občutljiva in specifična metoda za neposredno odkrivanje povzročiteljev. To omogoča ne samo ugotavljanje etiologije bolezni, temveč tudi spremljanje poteka infekcijskega procesa in oceno učinkovitosti zdravljenja.

Testiranje na SPO z metodo PCR je še posebej pomembno pri asimptomatskih infekcijskih procesih, ki jih povzročajo brezpogojno patogeni mikroorganizmi (klamidija, kvalitativno določanje DNK; mikoplazma, kvalitativno določanje DNK; povzročitelj gonoreje, kvalitativno določanje DNK; povzročitelj trihomonoze, kvalitativno določanje DNK). Na primer, s kronično gonorejo pri ženskah, tudi z bakteriološko metodo, pogosto ni mogoče identificirati gonokoka, kljub obstoječim simptomom kroničnega vnetnega procesa v materničnem vratu ali sečnici.

Sodobna diagnostika PCR omogoča ne le identifikacijo genetskega materiala povzročiteljev okužb, temveč tudi določanje njihove koncentracije DNA/RNA (kvantitativna oblika raziskave). Ugotavljanje števila povzročiteljev je pomembno pri odločitvi o zdravljenju, še posebej, če so identificirani oportunistični mikroorganizmi (Mycoplasma, kvantitativno določanje DNA; Tipizacija ureaplazme, kvantitativno določanje DNA).

Ena od glavnih usmeritev v razvoju metode PCR je format "Multiprime", razvit v CMD, ki omogoča odkrivanje več patogenov v eni epruveti (in eni reakciji).

• Povzročitelji okužb, ki jih prenašajo iksodidni klopi

PCR diagnostika hepatitisa

Trenutno je znanih vsaj 5 virusov, katerih sposobnost povzročanja poškodb jeter je dokazana. To so povzročitelji hepatitisa A, B, C, D, E. V redkih primerih lahko hepatitis povzročita virusa Epstein-Barr in herpes simplex. Sposobnosti povzročiteljev, kot sta virusa TT in hepatitisa G, da okužijo jetra, danes vsi ne priznavajo. Vsi ti virusi pripadajo različnim družinam, imajo različne biološke lastnosti in v skladu s tem se bodo tudi taktike zdravljenja bistveno razlikovale glede na etiologijo hepatitisa.

Ob upoštevanju zgoraj navedenega je zelo pereč problem ustrezna etiološka diagnoza virusnega hepatitisa z identifikacijo specifičnega povzročitelja. To je nemogoče brez uporabe sodobnih molekularno bioloških metod. Zato je diagnosticiranje hepatitisa z metodo verižne reakcije s polimerazo eden najpomembnejših korakov pri ugotavljanju vzroka bolezni in določanju nadaljnjih taktik zdravljenja.

PCR pri diagnozi okužbe s HIV

Trenutno se za laboratorijsko diagnozo okužbe s HIV uporablja najbolj dostopen in hkrati občutljiv pristop - odkrivanje protiteles proti HIV v krvi z uporabo encimsko imunskega testa (ELISA) - čemur sledi potrditev pozitivnih rezultatov testa. analizo z uporabo imunoblotinga (IB). Učinkovitost prepoznavanja ljudi, okuženih s HIV, s tem pristopom lahko doseže 99% ali več.

Toda serološka diagnoza okužbe s HIV ima številne omejitve:

1. Neučinkovitost v obdobju tako imenovanega “serološko okno” (v prvih tednih po okužbi se protitelesa zaradi odsotnosti ali nizke koncentracije ne odkrijejo).
2. Protitelesa proti virusu HIV so že dolgo odkrita pri vseh otrocih, rojenih materam, okuženim s HIV.
3. Lažno pozitivni rezultati ELISA zaradi prisotnosti v krvi protiteles proti antigenom, podobnim antigenom HIV.
4. Lažno negativni in vprašljivi rezultati ELISA in imunoblotinga (zlasti pri bolnikih v terminalni fazi bolezni).

Zato se testi PCR za odkrivanje okužbe s HIV vse bolj uporabljajo. V skladu z »Metodološkimi priporočili za testiranje na okužbo s HIV« (ki jih je odobrilo Ministrstvo za zdravje in socialni razvoj Ruske federacije 08.06.2007) »če obstajajo epidemiološka merila, ki kažejo na nedavno tveganje okužbe s HIV za bolnike in pri istočasno domnevno lažno pozitivni ali lažno negativni rezultati ELISA in IB, na primer. Pri pregledu otrok, rojenih od mater, okuženih s HIV, ali bolnikov v obdobju "seronegativnega okna" se uporablja metoda PCR, ki odkrije HIV. genski material ...« In v primeru že ugotovljene diagnoze okužbe s HIV se analiza PCR uporablja za prognozo, dinamično opazovanje in spremljanje terapije.

• Virus humane imunske pomanjkljivosti, kvalitativno določanje DNK provirusa, PCR
• Kvantitativno določanje RNA virusa humane imunske pomanjkljivosti, PCR
• Celovita diagnostika: kvalitativno določanje RNK virusa hepatitisa C/DNK virusa hepatitisa B/RNK virusa humane imunske pomanjkljivosti (HIV) tipa 1 in 2

V Centru za molekularno diagnostiko (CMD) lahko anonimno opravite PCR test za HIV.

PCR (verižna reakcija s polimerazo) je metoda molekularne genetike, ki omogoča analizo katerega koli kratkega zaporedja DNK (ali RNK) tudi v vzorcih, ki vsebujejo le majhne količine DNK ali RNK, s čimer se določi prisotnost/odsotnost patogenega patogena (do ugotoviti, na primer, ali obstaja človeški HIV ali virus hepatitisa B ali Mycobacterium tuberculosis). PCR se uporablja za reprodukcijo/množenje/kloniranje (pomnoževanje) izbranih delov DNK ali RNK za analizo.

Metoda PCR je tako preprosta, da jo lahko naredi celo šolar)

Prej je pomnoževanje DNK vključevalo kloniranje zanimivih segmentov v bakterijske ekspresijske vektorje in je trajalo tedne. Toda zdaj, ko se PCR izvaja v epruvetah, traja le nekaj ur. PCR je zelo učinkovito, tako da je iz DNK mogoče narediti ogromno število kopij.

Zaporedje DNA in nukleotidna korespondenca.

Naj roka darovalca nikoli ne mine

Projekt "AIDS.HIV.STD." je neprofitna organizacija, ki so jo ustanovili prostovoljni strokovnjaki za HIV/aids na lastne stroške, da bi ljudem prinesli resnico in bili čisti pred njihovo poklicno vestjo. Hvaležni bomo za vsako pomoč pri projektu. Naj se vam tisočkrat povrne: DONIRAJ .

Poleg tega PCR uporablja iste molekule, ki jih narava uporablja za kopiranje DNK:

• Dva "primera", kratka enoverižna zaporedja DNK, ki sta sintetizirana tako, da se ujemata z začetkom in koncem odseka DNK, ki ga je treba kopirati.
• Encim, imenovan polimeraza, ki se premika vzdolž segmenta DNK, prebere njegovo kodo in sestavi kopijo.
• Kup blokov DNK, ki jih mora narediti ta polimeraza.

To pomeni, da je PCR tehnika, pri kateri delce DNK (včasih RNK) pomnožimo v določeni raztopini ali na posebni površini, kamor jih lahko odložimo.

PCR je tehnika, ki znanstvenikom omogoča, da najdejo iglo v kupu sena in nato iz teh igel sestavijo kup sena.

Naloga PCR kot metode je, da jih pomnoži (pomnoži), naredi čim več kopij, tako da je mogoče ugotoviti, komu morda pripadajo (konkretni osebi, živali ali patogenemu organizmu), tudi če obstajajo samo sledi prisotnosti DNA/RNA.

Vendar pa je PCR pomnoževanje le del diagnostičnega testa. Po ojačanju ojačani segmenti primerjati z drugimi segmenti nukleotidov, ampak iz znanega vira(na primer določena oseba, žival ali patogeni organizem). Ta primerjava edinstvenih segmentov se pogosto izvede tako, da se nukleotidna zaporedja, ustvarjena s PCR, postavijo poleg znanih nukleotidnih zaporedij ljudi, patogenov ali drugih virov v posebnem gelu.

Ko gre električni tok skozi gel, različna nukleotidna zaporedja tvorijo pasove, ki so podobni "lestvi" glede na njihov električni naboj in velikost molekule. To se imenuje gelska elektroforeza. Migrirajo na iste ravni v gelu, kar kaže na istovetnost nukleotidnih zaporedij. Ta metoda je ena najbolj priljubljenih PCR testov v pozni fazi.

Kako deluje PCR?

Leta 1983 je Kari Mullis razvil osnovne korake za pomnoževanje zaporedij DNK. On in Michael Smith sta leta 1993 prejela Nobelovo nagrado za razvoj PCR.

PCR se izvaja v eni epruveti z ustreznimi kemikalijami in pri določeni temperaturi segrevanja.

Potrebni so naslednji reagenti ali kemikalije:

• Vzorec, ki vsebuje nukleotidno zaporedje (iz krvi, las, gnoja, kože itd.).
• Primerji DNA: kratka enoverižna DNA, ki je pritrjena na nukleotidna zaporedja, ki spodbujajo sintezo komplementarne verige nukleotidov.
• Polimeraza DNA: Encim, ki se, ko se DNA veže na začetni element, premika navzdol po fragmentu DNA in dodaja gradnike DNA, da tvori komplementarne bazne pare in tako sintetizira komplementarno nukleotidno verigo DNA (uvedba toplotno stabilne DNA polimeraze, Taq polimeraze, izpeljane iz bakterij, odpornih na vročino, bistveno izboljša sposobnost PCR).
• Velik presežek gradnikov DNK, imenovanih nukleotidi (adenin, timidin, citozin in gvanin, skrajšano: A, T, C oziroma G) v raztopini. Ko so ti bloki združeni, tvorijo nukleotidno zaporedje ali eno samo verigo DNA. Ko ti gradniki vežejo svoj komplementarni gradnik s šibkimi vodikovimi vezmi (na primer, A se bo vezal le na T in G samo na C), se oblikuje komplementarno nukleotidno zaporedje DNA, ki je povezano z izvirno enoverižno DNA. Ko je vezava končana, nastane komplementarna dvoverižna DNA v določenem zaporedju.

Kari Mullis je zelo zanimiv, kul fant, poglejte, kako zanimivo govori o tem, kako je prišel do PCR:

Verjame v astrologijo, vendar ne verjame, da HIV povzroča aids.)

Verižna reakcija s polimerazo se nato začne s segmentom DNK iz vzorca, ki ga damo v epruveto, ki vsebuje zgornje reagente. Raztopino segrejemo na 94°C. Segrevanje prekine vodikove vezi, ki omogočajo tvorbo komplementarnih verig DNA, zato v mešanici obstajajo samo enojne verige (to se imenuje denaturacija dvojne verige DNA).

Zmes pustimo, da se ohladi na 54 °C. Pri tej temperaturi se DNA primerji in DNA polimeraza vežejo na posamezno enoverižno DNA (to imenujemo žarjenje DNA). Ker so gradniki v mešanici v presežku (visoka koncentracija), jih polimeraza uporabi za ustvarjanje novih komplementarnih verig DNK (imenovanih podaljšek DNK), ta proces pa poteka hitreje pri 72 °C. Ta proces ustvari novo dvoverižno molekulo DNA iz vsake posamezne verige prvotne molekule.

Ta cikel se ponovi približno 40-krat v stroju, imenovanem termični cikler, ki samodejno ponavlja cikle segrevanja in hlajenja, pri čemer se količina vsakega zaporedja DNK podvoji vsakič, ko je cikel segrevanja in hlajenja zaključen. Kar je bil prvotno en kratek segment DNK, bi lahko po 40 ciklih podvajanja razširili na približno 100 milijard kopij.

Kdaj je potreben test PCR?

Test PCR je osnova za številne teste, ki lahko odgovorijo na številna različna medicinska vprašanja, ki zdravnikom pomagajo pri diagnosticiranju in zdravljenju bolnikov. Na primer, testi PCR lahko odkrivanje in prepoznavanje patogenih organizmov pri bolnikih, zlasti tistih, ki jih je težko kultivirati (npr. HIV in drugi virusi ter nekatere glivice).

Nekateri zdravniki predpisujejo PCR teste za pomoč pri diagnosticiranju genetske bolezni, medtem ko drugi zdravniki uporabljajo PCR za odkrivanje bioloških razmerij, kot je npr identifikacija staršev otrok. PCR testi se uporabljajo tudi za identifikacijo in karakterizacijo genetske mutacije in preureditve, ugotovljene pri določenih rakava obolenja.

Vendar pa so bili testi PCR spremenjeni in uvedeni v številne vidike znanstvenih raziskav, vključno z evolucijsko biologijo, genetskimi prstnimi odtisi, forenzičnimi raziskavami in mnogimi drugimi.

Kaj je RT-PCR?

PCR z reverzno transkriptazo (RT-PCR) je test PCR, ki je zasnovan za odkrivanje in merjenje količine RNA. Čeprav so začetni testi PCR pomnožili DNK, številni virusi in druge biološke komponente (kot so mitohondriji) uporabljajo RNK kot svoj genetski material. RT-PCR se razlikuje od običajne PCR tako, da najprej vzame RNA in spremeni RNA verigo v DNA verigo. To se naredi z v bistvu enako metodo za PCR, ki je opisana zgoraj, razen z uporabo encima, imenovanega reverzna transkriptaza, namesto DNA polimeraze.

Reverzna transkriptaza omogoča pretvorbo ene verige RNK v komplementarno verigo DNK. Ko pride do te reakcije, se lahko za pomnoževanje DNK uporabi rutinska metoda PCR. RT-PCR se uporablja za odkrivanje in proučevanje številnih virusov RNA. RT-PCR ne smemo zamenjevati z drugo različico PCR, imenovano PCR v realnem času.

PCR v realnem času je različica PCR, ki omogoča analizo pomnožene DNK v običajnih 40 ciklih postopka. Čeprav je postopek podoben običajnemu cikličnemu PCR, PCR v realnem času uporablja fluorescentna barvila, pritrjena na nekatere gradnike ali majhne nukleotidne verige. Odvisno od uporabljene metode se fluorescenca pojavi, ko nastanejo pomnožene verige DNA. Količino fluorescence je mogoče izmeriti v 40 ciklih in raziskovalcem omogoča merjenje določenih produktov in njihovih količin med cikli pomnoževanja.

To raziskovalcem ali tehnikom pogosto omogoča, da preskočijo gelsko elektroforezo ali druge sekundarne postopke, potrebne za analizo produktov PCR, in tako zagotovijo hitrejše rezultate. PCR v realnem času in RT-PCR sta različici ali modifikaciji izvirnega testa PCR. Obstaja pa veliko več možnosti (vsaj 25), ki obstajajo in se uporabljajo za reševanje določenih težav. Vsi imajo različna imena, kot so PCR sestavljanja, PCR vročega zagona, multipleksni PCR, polprevodniški PCR in še veliko več.

Kaj je PCR test za HIV?

PCR(verižna reakcija s polimerazo) - metoda razmnoževanja genskega materiala virusa, test, ki določa genetski material virusa- HIV RNA ali DNA.

Če je virus vsebovan v minimalni količini, potem se zaradi reakcije ta količina večkrat poveča. Zato ima PCR visoko diagnostično vrednost.

Običajno se ta test uporablja za določitev HIV v darovani krvi oz za zgodnje odkrivanje HIV v telesu, preden nastanejo specifična protitelesa proti HIV. Specifična protitelesa odkrijejo običajni testi na HIV (ELISA), vendar šele 1-3, redko 12 mesecev po okužbi. A z uporabo PCR lahko daš dokaj natančen odgovor po 14 dneh z 98% zaupanjem in tudi po 5 dneh, ampak takrat bo zaupanje 80%. HIV PCR je drag in bolj delovno intenziven test kot ELISA, torej Ne uporabljajo ga vsi, vendar le za posebne indikacije (darovalci, ki so utrpeli zdravniško nesrečo z osebo, okuženo s HIV) ali proti plačilu.

Kvalitativni PCR test za HIV— ugotavlja, ali je virus HIV-1/HIV-2 prisoten ali ne, vendar ne določa števila kopij virusa (za določanje števila se uporablja kvantitativna PCR). Visokokakovostni PCR se NE izvaja za tiste, ki imajo znano diagnozo okužbe s HIV. Njegovo To počnejo samo tistim, ki še ne vedo, ali so okuženi s HIV ali ne.

To je metoda za določanje komplementarne regije DNA v genomu celice limfocita, prizadete s HIV. Tisti. Ne določa se sam virus, ampak material, ki ga virus integrira v celico. Njena DNK bo že shranjena v jedru celice, iz katere se bo nato prebrala in razmnoževala (sama kopirala).

Kvantitativni PCR test za HIV

Kvantitativna analiza PCR za HIV RNA— določa število kopij RNA virusa v krvi (DNA PCR se uporablja za ugotavljanje virusa v celicah, npr. pri otrocih). Izvaja se samo pri ljudeh, okuženih s HIV, za spremljanje zdravljenja, ugotavljanje resnosti bolezni in učinkovitosti zdravljenja.

Koliko časa po okužbi je mogoče odkriti HIV z metodo PCR?

Koliko dni kasneje lahko opravim test PCR za HIV po stiku s HIV pozitivnim partnerjem?

HIV je mogoče odkriti s PCR 4-14 dni po okužbi. Negativen rezultat PCR na HIV je zanesljiv po 14 dneh po tveganem stiku, vendar je po veljavnih predpisih testiranje s pomočjo še vedno obvezno.

Kako se DNA PCR razlikuje od HIV RNA PCR?

RNA ki se običajno uporablja v kvantitativnih testih za oceno virusne obremenitve pri diagnosticiranih posameznikih, na primer za oceno učinkovitosti terapije.

DNK- v mononuklearnih celicah, na primer za diagnostiko pri otrocih, kjer materina protitelesa proti HIV preprečujejo uporabo metode ELISA.

Oba testa sta lahko kvantitativna in kvalitativna.

Oba se lahko uporabljata v posebnih primerih za diagnostiko, vendar ob upoštevanju posebnih omejitev, ki jih nalagajo tehnični parametri sistema, tj. po navodilih zdravnika.

Ali je lahko HIV PCR lažno pozitiven, razlogi?

Če je narejeno pravilno: medicinska sestra ni zamešala epruvet, pred odvzemom krvi pogledala v potni list, pravilno označila epruveto, pravilno napisala navodila ipd., laborant (običajno laborant) pa je naredil vse po navodilih, je izpolnjeval vse zahteve laboratorijskih predpisov (npr. biomaterial je bil pravilno »izkopan«, brez navzkrižne kontaminacije (kontaminacije) ipd.) in je bil uporabljen visokokakovosten testni sistem, POTEM je PCR LAHKO lažno pozitiven samo v 2. % primerov (to je posledica občutljivosti uporabljenih testnih sistemov) .

Ampak če je prišlo do napak s strani zdravstvenega osebja institucije , POTEM je PCR lahko lažno pozitiven v več kot 2 % primerov.

Kako poteka PCR testiranje na HIV?

Za testiranje na HIV z metodo PCR se krv daruje iz vene, po možnosti (vendar ne nujno) zjutraj na prazen želodec.

Kje se lahko testiram na HIV PCR?

Če želite to narediti, vnesite " opravi test PCR za HIV" in v zahtevo dodajte svoj kraj in videli boste organizacije, ki se na vašem območju ukvarjajo s PCR raziskavami.

na primer

Koliko stane test PCR za HIV?

blizu 1,5-3 tisoč rubljev. odvisno od regije.

Kakšna je zanesljivost rezultatov PCR testa za HIV?

Skozi 14 dni po okužbi je zanesljivost PCR za HIV 100%, od 4-5 dni - zanesljivost je 80%.

Koliko časa traja PCR test za HIV?

Tehnično 4-6 ur, v resnici pa je to odvisno od organizacije laboratorija in običajno dobi rezultat v 2-3 dneh.

PCR za HIV pri novorojenčku

Ker otrok, mlajši od 1,5 leta, rojen od HIV+ matere, ohrani protitelesa proti HIV, je nemogoče ugotoviti, ali je otrok okužen s HIV ali brez ELISA. V tem primeru se uporablja PCR:

• Če se virus odkrije pri 1-mesečnem otroku s PCR, to pomeni, da se je okužil.
• Če ima otrok negativen PCR pri 1-2 mesecih in 4-6 mesecih, potem je otrok zdrav, pod pogojem, da ga mati ni hranila z materinim mlekom.

Kakšna je razlika med PCR in ELISA?

PCR določa sam virus, ELISA pa določa reakcijo telesa (v obliki protiteles) na virus.

PCR zazna prisotnost virusa hitreje kot ELISA.

Metode za zdravljenje bolezni, ki jo povzroča virus humane imunske pomanjkljivosti, še niso našli. Toda diagnostika je dosegla resen uspeh. Test na HIV, opravljen z metodo PCR, je ena od možnosti za odkrivanje virusa v telesu.

Verižna reakcija s polimerazo ali PCR je ena od sodobnih metod za diagnosticiranje HIV. Temelji na sposobnosti nukleinskih kislin, da se same razmnožujejo. Celica katerega koli živega organizma vključuje beljakovine in nukleinske kisline:

• RNA - ribonukleinska kislina,
• DNK - deoksiribonukleinska kislina.

Te makromolekule hranijo genetsko kodo. Če je koncentracija virusnih celic v krvi nizka, vzorec ne vsebuje celotnih verig DNA, temveč njihove posamezne "gradnike" - nukleotide. Verižna reakcija s polimerazo zazna tudi takšne "fragmente" virusnih celic. To vam omogoča, da dobite rezultate zgodaj po morebitni okužbi, ko se prvi klinični simptomi še niso pojavili.

Najbolj natančen rezultat je mogoče dobiti z analizo venske krvi. Nekaj ​​dni pred pregledom. 2 tedna prej prenehajte jemati imunostimulante.

Vzorec biomateriala se prebavi v reaktorju medicinskega laboratorija. Frakcije se nato obdelajo z encimi. Reagenti se združijo z DNK virusne molekule in jo podvojijo. Iz ene celice dobite 2, iz 2 - 4, nato 8. Število eksponentno raste. Verižna reakcija vam omogoča, da hitro povečate količino virusne komponente in jo naredite vidno laboratorijskim tehnikom.

Norma je negativen rezultat testa, ki je videti takole: "DNK virusa ni zaznana." To je referenčna (statistično povprečna) vrednost.

Prednosti in slabosti tehnike PCR za HIV

Diagnosticiranje HIV s PCR ima nedvomne prednosti, vendar obstajajo tudi pomembne pomanjkljivosti. Prvi vključujejo:

• Visoka natančnost. Verjetnost lažno negativnih rezultatov je zelo majhna.
• Vsestranskost. Za raziskave ni primerna samo kri, ampak tudi druge biološke tekočine (izcedek iz nožnice, seme). Uporabljata se tudi slina in urin, vendar bo točnost rezultata manjša. V teh okoljih je koncentracija virusnih celic nepomembna.
• Širok nabor analiz. En vzorec biomateriala je mogoče testirati na več bolezni.
• Hitrost izvajanja. Verižna reakcija s polimerazo je nujna diagnostična metoda. Odgovor lahko izveste že naslednji dan.
• Zaupanje je 80-odstotno. Z metodo PCR lahko zaznamo virusne delce, tudi če je njihova koncentracija nizka. To vam omogoča, da diagnosticirate bolezen v zgodnjih fazah in pravočasno začnete zdravljenje.
• Zgodnja diagnoza okužbe s HIV. Čas, ko je HIV odkrit v krvi s PCR, je 10-14 dni po domnevni okužbi. To je standardni interval za diagnosticiranje virusa imunske pomanjkljivosti. na tej stopnji še niso odkriti; metoda ELISA ne deluje.
• Starostnih omejitev ni. To testiranje se lahko izvaja na otroku od rojstva.

Slabosti metode PCR pri diagnosticiranju HIV:

• Višji stroški v primerjavi z encimskim imunskim testom 3. generacije.
• Zahteva sofisticirano medicinsko opremo.
• Napaka je 20% zaradi visoke občutljivosti reakcije. V primeru avtoimunskih bolezni, malignih tumorjev, kroničnih okužb lahko PCR daje lažno pozitiven rezultat.

Kdo potrebuje PCR?

• Za predhodno diagnozo je potreben zgodnji odziv. PCR pomaga potrditi ali ovreči rezultate ELISA.
• Imunobloting je dal pozitiven rezultat. Če se najprej opravi analiza PCR, je obvezna potrditev rezultata z imunoblotingom. Raziskave se med seboj dopolnjujejo. Z uporabo dveh metod hkrati zdravniki odpravijo možnost napak.
• Ko je pozitiven rezultat, PCR pomaga spremljati učinkovitost terapije.
• Uporablja se za testiranje krvi darovalca za prisotnost.
• PCR se lahko izvaja tudi pri otrocih, mlajših od enega leta. Ta metoda se uporablja za ugotavljanje statusa HIV pri novorojenčkih, katerih matere so nosilke virusa. Test, opravljen v prvih dneh življenja, bo pokazal, ali je prišlo do intrauterine okužbe. Okužba se lahko pojavi med prehodom otroka skozi porodni kanal. ki jih je otrok pridobil med porodom, je mogoče prepoznati po 2 - 3 tednih.

Koliko časa traja PCR test in kje ga lahko dobim?

Izvedba PCR testa za HIV in dešifriranje rezultatov ne zahteva veliko časa. Odvzem krvi traja 5-7 minut. V standardnem primeru potrebuje laboratorijski tehnik le 24 ur za pripravo potrdila. Diagnoza ne traja več kot 8 ur, preostali čas je potreben za registracijo. Pacient prejme izvid naslednji delovni dan. opravite v 2 urah.

Testiranje na HIV na ta način se ne izvaja v okviru obveznega zdravstvenega zavarovanja. Te storitve ne morete prejeti brezplačno v javni kliniki. Toda skoraj vsi komercialni laboratoriji imajo običajno potrebno opremo in reagente. PCR testiranje je pogosto vključeno v splošni presejalni test za HIV. Cena kompleksne diagnostike se giblje od 600 do 1000 rubljev.

Postopek lahko zaključite anonimno. Na recepciji pacient dobi individualno številko, po kateri bo izvedel rezultat. Sodobni medicinski centri prikazujejo vse podatke na svoji spletni strani v osebnem računu stranke.

Glavna razlika med tema diagnostičnima metodama je v tem, da je testiranje na virus HIV (AIDS) natančnejše, zgodnejše in potrebno za popolno diagnozo in zdravljenje.

Čeprav test protiteles nima takšne natančnosti, ima nesporno prednost - nizko ceno in kratek čas izdelave.

• Izkušeni venerologi z več kot 20-letnimi izkušnjami
• Nujni testi za HIV, sifilis, hepatitis B, hepatitis C - 500 rubljev za eno okužbo bodo testi pripravljeni čez 20 minut
• Zdravljenje je anonimno - potni list ni potreben
• Klinika v središču Moskve, 5 minut od metro postaj Novokuznetskaya ali Tretyakovskaya, na voljo parkirišče

V ambulanti Poliklinika +1 lahko teste na protitelesa proti HIV (AIDS) opravimo v 20 minutah, darujemo kri iz vene. Stroški takšne analize so 500 rubljev.Ta in druge teste lahko opravite popolnoma ANONIMNO.

Testi na virus HIV (AIDS) postanejo pozitivni po 5-7 dneh

Testi na virus HIV (AIDS) postanejo pozitivni po 5-7 dneh od trenutka okužbe, postopoma povečujejo odstotek odkritja in dosežejo 100% v 30-40 dneh.

Treba je opozoriti, da lahko v zgodnjih fazah možne okužbe vzamete profilakso proti okužbi s HIV. To preprečevanje je bilo dobro preizkušeno pri nosečnicah, okuženih s HIV. Zaradi takšne preventive se 3 od 4 otrok rodijo zdravi.

Testi na virus HIV (AIDS) se izvajajo v dveh različicah:

• Odkrivanje HIV (AIDS) (izvid pozitiven-negativen)
• Odkrivanje HIV (AIDS) s koncentracijskim testom (če je test pozitiven, se določi količina virusa v 1 ml krvi). Ta test je zlati standard za diagnozo.

Čas za testiranje na virus HIV (AIDS) je od 3 do 10 dni

Testi za protitelesa (ELISA) proti HIV (AIDS) so odvisni od stanja telesa in se začnejo pojavljati v obliki pozitivnih rezultatov po 2-3 tednih; največja verjetnost odkrivanja takšne analize lahko doseže do 6 mesecev po okužbi. . Pri iskanju protiteles proti virusu HIV (AIDS) se najprej opravijo reakcije v običajnem laboratoriju, v primeru pozitivnega testa pa se kri pošlje v specializiran laboratorij za HIV. V tem primeru bolnika obvestimo, da se njegova kri hrani 10-15 dni. Samo specializiran laboratorij za HIV lahko izda sklep o pozitivnem testu na protitelesa proti virusu humane imunske pomanjkljivosti.

V ambulanti Poliklinika +1 lahko v 20 minutah opravimo teste na protitelesa proti HIV, za kar opravimo odvzem krvi iz vene.

Stroški takšne analize 500 rubljev. Ta in druge teste lahko opravite v celoti ANONIMNO.

Čakamo vas na naši kliniki.

Okužba s HIV je huda virusna bolezen z dolgim ​​asimptomatskim obdobjem, za katero je značilna okvara človeškega imunskega sistema in nevarna zaradi pozne diagnoze. Izraza "HIV" in "AIDS" se pogosto uporabljata kot sinonima, v resnici pa je AIDS končna (zadnja) stopnja okužbe s HIV, ki traja 1-2 leti. Po raziskavah od trenutka okužbe do vstopa bolezni v terminalno fazo brez zdravljenja v povprečju mine 9-11 let. Zgodnja diagnoza bolezni z uporabo ELISA ali PCR analize za HIV vam omogoča, da pravočasno začnete protiretrovirusno terapijo, ustavite napredovanje bolezni in vodite polno življenje več let, kljub prisotnosti virusa človeške imunske pomanjkljivosti v telesu.

Poti prenosa HIV:

• nezaščiten spolni odnos;
• transfuzija krvi in ​​krvnih pripravkov;
• uporaba nesterilnih instrumentov med medicinskimi posegi;
• poškodbe medicinskega osebja z nesterilnimi instrumenti;
• perinatalna okužba: prenos virusa med nosečnostjo in porodom.

Predpisani so testi za AIDS (HIV):

• med priložnostnim spolnim stikom;
• pri načrtovanju nosečnosti in med nosečnostjo;
• priprava na hospitalizacijo;
• z nenadno izgubo teže;
• z dolgotrajnim zvišanjem telesne temperature neznanega izvora.

Hitri krvni test za HIV

• za odkrivanje virusa med "seronegativnim oknom";
• če je rezultat imunoblota vprašljiv;
• določiti genotip virusa - HIV-1 ali HIV-2;
• za nadzor virusne obremenitve telesa;
• določiti status HIV pri novorojenčkih, če je mati okužena s HIV;
• po transfuziji krvi.

Anonimni test za HIV

Opozorite na: rezultatov anonimnih testov na aids (HIV) ni mogoče uporabiti za strokovne preglede, hospitalizacijo ali posredovanje lečečemu zdravniku v ambulanti.

Rezultati testa na HIV, ne glede na njihov rezultat, se izdajo le, če se bolnik osebno obrne na laboratorijski oddelek. Pri pregledu mladoletnikov (mlajših od 14 let) - zakonitemu zastopniku, ki je naveden v naročilu.

Izvidi se izdajo ob predložitvi pogodbe, predračuna in identifikacijskega dokumenta pacienta samega ali njegovega zastopnika, navedenega v naročilu.

ČE JE TEST NA HIV PREDPISAN ZARADI PRIPRAVE NA HOSPITALIZACIJO ALI ZA OPRAVLJANJE V ZDRAVSTVENI USTANOVI, SE REGISTRACIJA PRIJAVE NA NJEGA IZVAJA pod pogojem, da pacient obvezno predloži naslednje podatke:

1) Za prebivalce Moskve in moskovske regije

• Polno ime
• Dan, mesec in leto rojstva
• Podatki o registraciji
• Potni list
• Zavarovalna polica (serija in številka zavarovalne police, ime zavarovalnice).

• Polno ime
• Dan, mesec in leto rojstva
• Podatki o registraciji
• Zavarovalna polica (serija in številka zavarovalne police, ime zavarovalnice)
• Fotokopija (sken) potnega lista

Koliko časa traja testiranje na HIV?

Rezultate testa ELISA lahko dobite v 1 delovnem dnevu, vendar ne prej kot 1,5-3 mesece od datuma suma okužbe, rezultat diagnostike PCR pa v 10 dneh od datuma suma okužbe. Čas za izvedbo testa PCR v realnem času je 3 delovne dni.